Диски с реактивом на нитриты
|
DD042
|
Диски с индикатором. Двойная упаковка.
Используются в качестве индикатора для определения нитратредуктазной активности микроорганизмов.
Часть А: Диски для обнаружения нитратредуктазной активности - 50 шт.
Часть Б: Проявляющая жидкость - 5 мл.
Восстановление нитратов (NO3) до нитритов (NO2) и газообразного азота (N2) обычно происходит в анаэробных условиях, когда осуществляется т. н. нитратное дыхание – перенос электронов от окисляемого субстрата на нитраты (22). Большинство факультативных анаэробов в бескислородной среде для получения энергии пользуются нитратным или другими типами дыхания, при которых акцептором электронов является не кислород, а неорганические вещества (23).
Конечные продукты восстановления нитрата зависят от видовой принадлежности микроорганизма, но чаще конечным продуктом является молекулярный азот (23). Обычно эти продукты далее не участвуют в клеточном метаболизме и не окисляются, а выделяются в окружающую среду.
Данный тест предназначен для определения микробной нитратредуктазы, которая в присутствии подходящего окисляемого субстрата восстанавливает нитрат до нитрита. Появление нитрита определяют колориметрическими методами. Почти все энтеробактерии восстанавливают нитраты. Когда диск с реактивом накладывают на колонию нитратредуцирующего микроорганизма, выросшего на агаре с нитратом, развивается розово-красное окрашивание.
Испытуемую культуру выращивают на поверхности плотной среды, содержащей нитратный субстрат (M072, Нитратный агар) . Затем на рост или подозрительную колонию накладывают диск (Часть А). В случае положительной реакции (присутствие нитратредуктазы) появления красно-розового окрашивания диска в течение 1–2 минут свидетельствует о наличии у микроба нитратредуктазной активности. Для усиления цвета добавить 1 каплю проявляющей жидкости (Часть Б) на диск.
Реакции референс-штаммов на Нитратном агаре (М072) через 18–24 ч инкубирования при 35°С:
Штаммы микроорганизмов (АТСС)
|
Рост
|
Восстановление нитрата
|
Acinetobactercalcoaceticus (19606)
|
Хороший
|
–
|
Enterobacter aerogenes (13048)
|
Хороший
|
+
|
Escherichia coli (25922)
|
Хороший
|
+
|
Salmonella серовар Typhimurium (19615)
|
Хороший
|
+
|
Примечание:
+ положительный результат (появление красного или розового окрашивания диска);
– отрицательный результат (цвет диска не изменяется).
Диски хранить при 0…+8°С. Не используйте реактивы после истечения срока годности
ВНИМАНИЕ: материалы надо держать во влагонепроницаемых контейнерах с поглотителем влаги. Перед тем, как открыть контейнер, надо дать ему нагреться до комнатной температуры.