Biochemical Identification Test Kits

Введение

HiMedia предлагает ряд наборов для биохимической идентификации микроорганизмов (от KB001 до KB012) и наборов для биохимической идентификации на основе теста на подвижность (от KBM01 до KBM003). Каждый тест для биохимической идентификации стандартизован по цвету. Тесты основаны на общепринятых принципах изменения рН и утилизации субстрата. В процессе инкубирования проявляется метаболитическая активность микроорганизмов, которая влечет изменение цвета среды видимые сразу или после добавления соответствующих реагентов.

В состав каждого набора входит:

1. Панели с наборами тестов для биохимической идентификации
2. Инструкция по использованию
3. Таблицы для записи результатов и их интерпретации
4. Компьютерная программа для идентификации микроорганизмов
5. Набор реактивов, если они необходимы
6. Петли бактериологические одноразовые
7. Капельницы одноразовые калиброванные
8. Пробирки со средой для подращивание микроорганизмов
9. Пробирки со средой для приготовления суспензии микроорганизмов
   
   

ВНИМАНИЕ!
Компьютерная программа для идентификации микроорганизмов (для всех наборов) не входит в состав набора и поставляется отдельно, по запросу пользователя.

Кат. №	Наименование
KB001R-10KT	HiIMViC Набор для биохимической идентификации энтеробактерий (12 тестов), (1уп. х 10 наборов) (панель с тестами, реагенты, пробирки со средами, петли, капельницы, таблицы) (ФСЗ 2008/01440)
KB001R-20KT	HiIMViC Набор для биохимической идентификации энтеробактерий (12 тестов), (1уп. х 20 наборов) (панель с тестами, реагенты, пробирки со средами, петли, капельницы, таблицы) (ФСЗ 2008/01440)
KB002R-10KT	HiAssorted Набор для биохимической идентификации грамотрицательных бактерий (12 тестов), (1уп. х 10 наборов) (панель с тестами, реагенты, пробирки со средами, петли, капельницы, таблицы) (ФСЗ 2008/01440)
KB002R-20KT	HiAssorted Набор для биохимической идентификации грамотрицательных бактерий (12 тестов), (1уп. х 20 наборов) (панель с тестами, реагенты, пробирки со средами, петли, капельницы, таблицы) (ФСЗ 2008/01440)
KB003R-10KT	Hi25 Набор для биохимической идентификации энтеробактерий (25 тестов), (1уп. х 10 наборов) (панель с тестами, реагенты, пробирки со средами, петли, капельницы, таблицы) (ФСЗ 2008/01440)
KB003R-20KT	Hi25 Набор для биохимической идентификации энтеробактерий (25 тестов), (1уп. х 20 наборов) (панель с тестами, реагенты, пробирки со средами, петли, капельницы, таблицы) (ФСЗ 2008/01440)
KB004R-10KT	HiStaph Набор для биохимической идентификации стафилококков (12 тестов), (1уп. х 10 наборов) (панель с тестами, реагенты, пробирки со средами, петли, капельницы, таблицы) (ФСЗ 2008/01440)
KB004R-20KT	HiStaph Набор для биохимической идентификации стафилококков (12 тестов), (1уп. х 20 наборов) (панель с тестами, реагенты, пробирки со средами, петли, капельницы, таблицы) (ФСЗ 2008/01440)
KB005AR-10KT	HiStrep Набор для идентификации стрептококков, (1уп. х 10 наборов) (панель с тестами, реагенты, пробирки со средами, петли, капельницы, таблицы) (ФСЗ 2008/01440)
KB005AR-20KT	HiStrep Набор для идентификации стрептококков, (1уп. х 20 наборов) (панель с тестами, реагенты, пробирки со средами, петли, капельницы, таблицы) (ФСЗ 2008/01440)
KB006R-10KT	HiCandida Набор для идентификации грибов рода Candida, (1уп. х 10 наборов) (панель с тестами, реагенты, пробирки со средами, петли, капельницы, таблицы) (ФСЗ 2008/01440)
KB006R-20KT	HiCandida Набор для идентификации грибов рода Candida, (1уп. х 20наборов) (панель с тестами, реагенты, пробирки со средами, петли, капельницы, таблицы) (ФСЗ 2008/01440)
KB007R-10KT	HiVibrio Набор для идентификации вибрионов (Vibrio spp.), (1уп. х 10 наборов) (панель с тестами, реагенты, пробирки со средами, петли, капельницы, таблицы) (ФСЗ 2008/01440)
KB007R-20KT	HiVibrio Набор для идентификации вибрионов (Vibrio spp.), (1уп. х 20 наборов) (панель с тестами, реагенты, пробирки со средами, петли, капельницы, таблицы) (ФСЗ 2008/01440)
KB008R-10KT	HiNeisseria Набор для идентификации нейссерий, (1уп. х 10наборов) (панель с тестами, реагенты, пробирки со средами, петли, капельницы, таблицы) (ФСЗ 2008/01440)
KB008R-20KT	HiNeisseria Набор для идентификации нейссерий, (1уп. х 20 наборов) (панель с тестами, реагенты, пробирки со средами, петли, капельницы, таблицы) (ФСЗ 2008/01440)
KB009R-10KT	HiCarbo Набор для изучения ферментации углеводов (36 тестов: Часть А + Часть В + Часть С), (1уп. х 10 наборов) (панель с тестами, пробирки со средами, петли, капельницы, таблицы) (ФСЗ 2008/01440)
KB009R-20KT	HiCarbo Набор для изучения ферментации углеводов (36 тестов: Часть А + Часть В + Часть С), (1уп. х 20 наборов) (панель с тестами, пробирки со средами, петли, капельницы, таблицы) (ФСЗ 2008/01440)
KB009AR-10KT	HiCarbo Набор для изучения ферментации углеводов – (часть А - 12 тестов), (1уп. х 10 наборов) (панель с тестами, пробирки со средами, петли, капельницы, таблицы) (ФСЗ 2008/01440)
KB009AR-20KT	HiCarbo Набор для изучения ферментации углеводов – (часть А – 12 тестов), (1уп. х 20 наборов) (панель с тестами, пробирки со средами, петли, капельницы, таблицы) (ФСЗ 2008/01440)
KB009BR-10KT	HiCarbo Набор для изучения ферментации углеводов – (часть B – 12 тестов), (1уп. х 10 наборов) (панель с тестами, пробирки со средами, петли, капельницы, таблицы) (ФСЗ 2008/01440)
KB009BR-20KT	HiCarbo Набор для изучения ферментации углеводов – (часть B – 12 тестов), (1уп. х 20 наборов) (панель с тестами, пробирки со средами, петли, капельницы, таблицы) (ФСЗ 2008/01440)
KB009CR-10KT	HiCarbo Набор для изучения ферментации углеводов – (часть C – 12 тестов), (1уп. х 10 наборов) (панель с тестами, пробирки со средами, петли, капельницы, таблицы) (ФСЗ 2008/01440)
KB009CR-20KT	HiCarbo Набор для изучения ферментации углеводов – (часть C – 12 тестов), (1уп. х 20 наборов) (панель с тестами, пробирки со средами, петли, капельницы, таблицы) (ФСЗ 2008/01440)
KB010R-10KT	HiE. coli Набор для идентификации кишечных палочек, (12 тестов) (панель с тестами, реагенты, пробирки со средами, петли, капельницы, таблицы) (1уп. х 10 наборов) (ФСЗ 2008/01440)
KB010R-20KT	HiE. coli Набор для идентификации кишечных палочек, (12 тестов) (панель с тестами, реагенты, пробирки со средами, петли, капельницы, таблицы) (1уп. х 20 наборов) (ФСЗ 2008/01440)
KB011R-10KT	HiSalmonella Набор для идентификации Salmonella spp., (1уп. х 10 наборов) (панель с тестами, реагенты, пробирки со средами, петли, капельницы, таблицы) (ФСЗ 2008/01440)
KB011R-20KT	HiSalmonella Набор для идентификации Salmonella spp., (1уп. х 20 наборов) (панель с тестами, реагенты, пробирки со средами, петли, капельницы, таблицы) (ФСЗ 2008/01440)
KB012R-10KT	HiListeria Набор для идентификации Listeria spp., (1уп. х 10 наборов) (панель с тестами, реагенты, пробирки со средами, петли, капельницы, таблицы) (ФСЗ 2008/01440)
KB012R-20KT	HiListeria Набор для идентификации Listeria spp., (1уп. х 20 наборов) (панель с тестами, реагенты, пробирки со средами, петли, капельницы, таблицы) (ФСЗ 2008/01440)
KB013R-10KT	HiCarbo Набор для изучения ферментации углеводов, (Набор для идентификации Bacillus spp.), (1уп. х 10 наборов) (панель с тестами, реагенты, пробирки со средами, петли, капельницы, таблицы) (ФСЗ 2008/01440)
KB013R-20KT	HiCarbo Набор для изучения ферментации углеводов, (Набор для идентификации Bacillus spp.), (1уп. х 20 наборов) (панель с тестами, реагенты, пробирки со средами, петли, капельницы, таблицы) (ФСЗ 2008/01440)
KB014R-10KT	HiCarbo Набор для изучения ферментации углеводов (Набор для идентификации Acinetobacter spp.) (1уп. х 10 наборов) (панель с тестами, реагенты, пробирки со средами, петли, капельницы, таблицы) (ФСЗ 2008/01440)
KB014R-20KT	HiCarbo Набор для изучения ферментации углеводов (Набор для идентификации Acinetobacter spp.) (1уп. х 20 наборов) (панель с тестами, реагенты, пробирки со средами, петли, капельницы, таблицы) (ФСЗ 2008/01440)
KBM001R-10KT	HiMotility Набор для биохимической идентификации E.coli, (1уп .х 10 наборов) (панель с тестами, реагенты, пробирки со средами, петли, капельницы, таблицы) (ФСЗ 2008/01440)
KBM001R-20KT	HiMotility Набор для биохимической идентификации E.coli, (1уп. х 20 наборов) (панель с тестами, реагенты, пробирки со средами, петли, капельницы, таблицы) (ФСЗ 2008/01440)
KBM002R-10KT	HiMotility Набор для биохимической идентификации Salmonella, (1уп. х 10 наборов) (панель с тестами, реагенты, пробирки со средами, петли, капельницы, таблицы) (ФСЗ 2008/01440)
KBM002R-20KT	HiMotility Набор для биохимической идентификации Salmonella, (1уп. х 20 наборов) (панель с тестами, реагенты, пробирки со средами, петли, капельницы, таблицы) (ФСЗ 2008/01440)
KBM003R-10KT	HiMotility Набор для биохимической идентификации Listeria, (1уп. х 10 наборов) (ФСЗ 2008/01440)
KBM003AR-20KT	HiMotility Набор для биохимической идентификации Listeria, (1уп. х 20 наборов) (панель с тестами, реагенты, пробирки со средами, петли, капельницы, таблицы) (ФСЗ 2008/01440)

 

Общая информация

Приготовление инокулома

• Для идентификации можно использовать только чистую культуру микроорганизмов.
• Выделять микроорганизмы можно на таких средах, как Питательный агар (M001) или других подходящих дифференциальных средах.
• Отобрать единичную колонию и суспендировать её в 5 мл Бульона с сердечно-мозговой вытяжкой (M210). Инкубировать 4-6 часов при 35-37⁰С до получения необходимой мутности. Некоторые прихотливые микроорганизмы могут требовать более длительной инкубации, и в этом случае подращивание следует продолжать до достижения необходимой мутности.
• Если можно отобрать 1 – 3 хорошо изолированные колонии, суспендируйте их в 2 –3 мл стерильной среды для приготовления суспензии, доводя мутность суспензии до необходимой.
• Дальнейшие манипуляции проводите в соответствие с инструкцией к каждому конкретному набору.
• Сравнивая полученные результаты с таблицей для интерпретации, внесите их в таблицу для записей.

Примечание:

• Ошибочный, ложноотрицательный результат, может получаться при оптической плотности (мутности) инокулома менее чем 0,1.
• Наиболее четкие результаты получаются при использовании обогащенной культуры по сравнению приготовленной суспензией.

Внесение инокулума культуры

• Открыть крышку панели с тестами, соблюдая правила антисептики. Снять защитную пленку. Внести в каждую ячейку панели по 50 мкл инокулома (2 капли из пипетки PW1201) на поверхность среды;
• ВНИМАНИЕ!

При использовании панелей для биохимической идентификации серии KBM ячейка № 1 засевается уколом бактериологической иглой, все другие ячейки (кроме ячейки № 2) засевать уколом калиброванной на 10 мкл петлёй.

Инкубация:

KBM001, KBM002 и все панели от KB001 до KB012 инкубировать при 35 ± 2⁰С в течение 18 –24 часов; KB006 инкубировать при комнатной температуре (22 – 25⁰С) в течение 48-72 часов и KBM003 инкубировать при комнатной температуре (22 – 25⁰С) в течение 24-48 часов.

Реактивы:

Каждый набор комплектуется необходимыми реактивами для выявления биохимических реакций исследуемых микроорганизмов.

Меры предосторожности

Все образцы клинического материала и микробные культуры рассматриваются как потенциально патогенные.

• Соблюдение условий асептики должно распространятся на все время работы с набором.
• Е допускать контакта реактивов с кожей, глазами и одеждой.

Утилизация использованного материала
После использования наборы и инструменты для выделения и инокулирования (капельницы, пипетки, петли и т.д.) должны быть дезинфицированы в соответствующих дезинфектантах а затем обеззаражены автоклавированием.

 

Принцип включения биохимических тестов

Этот тест обнаруживает способность микроорганизма продуцировать достаточное количество фермента фосфатазы. Продукция фосфотазы определяется высвобождением фенолфталеина. Фенолфталеин реагирует со щелочью (40% NaOH), что приводит к появлению яркой розовой окраски.Тест на щелочную фосфатазу.

Тест декарбоксилирования аминокислот (лизин, орнитин, аргинин)

Среда для этого теста содержит бромкрезоловый пурпурный, как индикатор рН. При утилизации карбогидрата, присутствующего в среде, рН снижается, в соответствии с продукцией кислоты, что приводит к изменению окраски среды на желтую. Продукция кислоты стимулирует фермент декарбоксилазу. Появление аминов в результате декарбоксилирования повышает рН среды, что изменяет цвет с оливкового зеленого или светло-пурпурного до пурпурного или темно-пурпурного. На негативную реакцию указывает появление желтой окраски среды.

В случае декарбоксилирования орнитина и лизина инкубацию можно увеличить до 48 часов.

 

Утилизация карбогидратов

Карбогидраты добавляют в основу среды, которая в качестве индикатора содержит феноловый красный. При ферментации карбогидрата выделяется кислота, что приводит к снижению рН среды и изменению окраски на желтую. Негативная реакция проявляется или не изменением окраски, или изменением на оранжево-красную / розовую.

Некоторые микроорганизмы при ферментации карбргидратов проявляют замедленную реакцию. В этом случае результат фиксируют как (±) и продолжают икубировать до 48 часов. Формирование оранжевой окраски после 48 часов инкубации интерпретируют как отрицательный результат.

Каталаза

Организмы, продуцирующие каталазу, имеют способность разлагать перекись водорода с образованием кислорода. Это проявляется в виде образования пузырьков на поверхности среды при добавлении капли 3% раствора перекиси водорода в ростовую среду.

Цитратный тест

Среда содержит натрия цитрат, как единственный источник углерода, индикатор бромтимоловый синий и неорганическую аммонийную соль. Микроорганизмы, способные утилизировать цитрат, как единственный источник углерода, также утилизируют аммонийную соль, как единственный источник азота. Аммонийная соль расщепляется до NH3, что приводит к защелачиванию среды и изменению окраски с зеленой на синюю.

Тест гидролиза эскулина

Эскулин – глюкозид, который гидролизуется определенными бактериями с образованием глюкозы и эскулетина. Эскулетин, взаимодействуя с присутствующими в среде ионами железа, образует комплекс черного цвета.

Глюкуронидаза

Фермент глюкуронидаза расщепляет субстрат х-глюкуронид, добавленный в питательную среду. Микроорганизмы абсорбируют субстрат, а внутриклеточная глюкуронидаза разрывает связи между хромофором и глюкуронидом. Хромофор придает синевато-зеленую окраску выросшей колонии или окрашивает всю среду.

Тест продукции сероводорода (H₂S)

Все виды энтеробактерий способны продуцировать различные количества H₂S. Микроорганизмы способны с помощью энзимов высвобождать серу из серосодержащих аминокислот или неорганических соединений серы. Сероводород реагирует с ионами железа или с ацетатом свинца, образуя сульфид железа или сульфид свинца, которые дают нерастворимый преципитат. Почернение среды свидетельствует о позитивной реакции.

Тест продукции индола

Этот тест демонстрирует способность определенных бактерий разлагать аминокислоту триптофан до индола, который аккумулируется в среде. При добавлении реактива Ковача (R008) в ростовую среду, появление красно-розовой окраски в течение 10 секунд указывает на положительный результат.

Малонатный тест

В среде для малонатного теста в качестве индикатора используется бромтимоловый синий. Натрия малонат и аммония сульфат являются единственными источниками углерода и азота соответственно.

Тест с метиловым красным

Тест с метиловым красным основан на регистрации изменения рН среды при утилизации микроорганизмами глюкозы. При добавлении одной капли индикатора метилового красного (I007) в конце периода инкубации если окраска становится ярко красной, то констатируется положительная реакция, если желтая или желто-оранжевая – реакция негативная.