HiSpeed SALMO 24 Culturing System

Новая культуральная система

Простое, Быстрое и Достоверное определение сальмонелл

Safe Culturing System предназначена для определения сальмонелл:

1 проба крови - 2 пробы кала - 3 пробы мочи

До введения в клиническую практику 50 лет назад хлорамфеникола брюшной тиф был смертельно опасным заболеванием, особенно в странах с тропическим климатом. Но и в наши дни эта проблема остается актуальной.

Брюшной тиф – это серьезная генерализованная инфекция, которая часто встречается в развивающихся странах ввиду недостатка питьевой воды, нищеты и антисанитарии. Заболевание проявляется изнурительной лихорадкой и головной болью при отсутствии признаков диареи. Человек может быть и внешне здоровым бактериовыделителем. Инфицирующая доза при брюшном тифе довольно низка – менее 1 тыс. клеток. Инкубационный период варьирует от 1 до 6 недель. Для заболевания характерен фекально-оральный или контактно-бытовой механизмы передачи инфекции. Основные пути заражения – водный и пищевой. Наряду с Salmonella серовара Typhi, тифоподобные заболевания вызывают и некоторые другие сальмонеллы – возбудители паратифов (Salmonella сероваров Paratyphi A, Paratyphi B, Paratyphi C).

Возбудитель: брюшной тиф и паратифозные заболевания вызывают представители рода Salmonella. Как и другие энтеробактерии, сальмонеллы являются грамотрицательными палочками, ферментирующими факультативно-анаэробными и оксидазоотрицательными микроорганизмами. Подвижны за счет перитрихиально расположенных жгутиков, лактозу не ферментируют, мочевину не разлагают, цитрат утилизируют, чувствительны к цианиду калия. Хорошо растут на агаре МакКонки.

В настоящее время различают два вида сальмонелл:

1. Salmonella enterica: имеет 6 подвидов, в том числе Salmonella enterica ssp. enterica, которые обычно выделяют от человека и некоторых теплокровных животных.

2. Salmonella bongori (ранее известные, как сальмонеллы ДНК-5-й группы).

Диагностика инфекции

Лабораторное подтверждение инфекции основано, главным образом, на выделении и идентификации сальмонелл из организма больного.

Исследуемый материал: Все пробы помещают в стерильные контейнеры.

1.Кровь: Бактериемия отмечается в первые 7-10 дней болезни; гемокультуру в этот период выделяют у 90% больных.

2.Испражнения: Это наиболее часто исследуемый материал; копрокультуру выделяют чаще всего на 10-14 день инфекции, но она может быть выделена и на 3-й неделе.

3.Моча: Сальмонеллы могут выделяться с мочой, но не постоянно, поэтому могут потребоваться повторные исследования.

4.Рвотные массы, синовиальная жидкость, гной: В зависимости от клинических проявлений инфекции, эти материалы тоже могут исследоваться в лаборатории.

5.Сыворотка крови: Серологические исследования могут давать сомнительные результаты.

Выделение сальмонелл из крови является “золотым стандартом” диагностики бактериемии, вызываемой этими микроорганизмами.

Диагностика заболеваний, вызванных сальмонеллами, рутинными методами обычно занимает 3-4 дня. В первый день материал засевают в тетратионатный или селенитовый бульон. На второй день обогащенную культуру рассевают на Дезоксихолат-цитратном агаре или Ксилозо-лизиновом дезоксихолатном агаре. Затем выросшие подозрительные колонии отбирают и идентифицируют, определяя у чистой культуры уреазную активность и другие биохимические свойства на дифференциальных средах.

В настоящее время компания HiMedia предлагает быструю тест-систему, которая всего лишь за 24 ч позволяет определить возбудителя инфекции. Предлагаемая комбинация питательных сред позволяет проводить обогащение, получать и идентифицировать колонии в течение 24 ч. Ниже представлены различные комбинации таких сред.

Ход исследования

1.Подписывают флакон с двухфазной средой.

2.Для выделения гемокультуры: а) Крышку флакона не отвинчивать! Удаляют только верхнюю часть крышки; б) Дезинфицируют открывшуюся часть резиновой пробки; в) Стерильной (одноразовой) иглой и шприцем берут кровь больного общепринятым методом; г) Немедленно переносят кровь во флакон с питательной средой, прокалывая резиновую пробку той же иглой. В случае задержки посева исследуемую кровь оставляют при комнатной температуре.

3.Для другого материала: засевают непосредственно в жидкую фазу системы, соблюдая правила асептики.

4. Инкубируют засеянные флаконы при 37° С 4-5 ч.

5. Наклоняют флакон на несколько секунд, чтобы засеять таким образом обогащенную в бульоне культуру на поверхность агара.

Учет результатов: После инкубирования на поверхности агара вырастают черные колонии, бесцветные колонии дают только сальмонеллы серовара Paratyphi A.

Для взятия материала компания HiMedia предлагает специальные контейнеры:

PW017 Sterile Clinicol – стерильный контейнер

PW018 Sterile Unicol – стерильный контейнер

PW051 Multipurpose Clinical Sample Collector (autoclavable) – многофункциональный автоклавируемый контейнер

Для хранения и транспортировки в лабораторию клинического материала спрашивайте Транспортную среду Стюарта (М306).

Двухфазные среды для культивирования сальмонелл

*LQ - жидкая среда, хранить при 2…8° С. Срок годности: 1 год.

Двухфазная среда HiCombi для выделеня сальмонелл

	Незасеянная двойная среда с жидкой и твердой фазой для выделения гемокультур
	Видны колонии Salmonella enterica ssp. enterica, выросшие на твердой фазе (агаре Гектоен энтерик) в течение 24 ч, а также помутнение и почернение жидкой фазы.