|
Stains for Acid Fast Staining
Набор для окрашивания кислотоустойчивых микроорганизмов
|
K005
|
Состав набора:
|
Карболовый фуксин
|
S005
|
|
Раствор для обесцвечивания
|
S033
|
|
Метиленовый синий по Леффлеру
|
S022
|
Реактивы:
1. Карболовый фуксин (S005):
|
Основной фуксин
|
0,3 г
|
|
Спирт этиловый, 95%
|
10,0 мл
|
|
Фенол
|
5,0 мл
|
|
Вода дистиллированная
|
95,0 мл
|
2. Раствор для обесцвечивания (S033):
|
Кислота соляная, концентрированная
|
3,0 мл
|
|
Спирт этиловый, 95%
|
97,0 мл
|
3. Метиленовый синий (по Леффлеру) (S022):
|
Метиленовый синий
|
0,3 г
|
|
Спирт этиловый, 95%
|
30,0 мл
|
|
Вода дистиллированная
|
100,0 мл
|
Методика окраски:
1. Приготовить мазок на чистом, сухом предметном стекле.
2. Подсушить на воздухе и фиксировать нагреванием.
3. Покрыть мазок раствором карболового фуксина (S005). Нагревать до образования пара в течение 5 мин. Не допускать кипения краски и высыхания мазка.
4. Подсушить 5 мин без дальнейшего нагревания.
5. Промыть проточной водой.
6. Обесцветить раствором для обесцвечивания (S033) в течение 2 мин или до тех пор, пока краска не прекратит вымываться. Если промывание сделано недостаточно хорошо, можно получить ложноположительные результаты.
7. Промыть проточной водой.
8. Окрашивать 30 сек раствором метиленового синего (S022).
9. Промыть проточной водой, высушить на воздухе.
Результаты:
1.Кислотоустойчивые микроорганизмы окрашиваются в яркий красный цвет.
2.Все другие микроорганизмы и клеточный материал окрашиваются в синий цвет.
ВНИМАНИЕ! Если предполагается выделение Mycobacterium leprae или Nocardia, используйте для обесцвечивания 1% раствор серной кислоты.
