Fluid Selenite Cystine Medium (Selenite Cystine Medium)
Жидкая цистин-селенитовая среда
М025А
Fluid Selenite Cystine Broth (Selenite F Broth)
Цистин-селенитовый бульон
M025I

 

Эти среды используют в качестве сред обогащения для выделения сальмонелл из фекалий, мочи и другого патологического материала.

Состав**:

Ингредиенты
М025А
грамм/литр
М025I
грамм/литр
Гидролизат казеина
5,00
5,00
Лактоза
4,00
4,00
Натрия гидрофосфат (х 12 Н2О)
10,00
Натрия гидрофосфат
10,00
Натрия селенит
4,00
4,00
L-цистин
0,01
0,01
Конечное значение рН (при 25°С) 7,0 ± 0,2
 
 

** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам

Приготовление:

Размешать 23,0 г порошка М025А или 17,0 г порошка М025I в 1000 мл дистиллированной воды. Подогреть для полного растворения частиц. Разлить в стерильные пробирки. Стерилизовать в кипящей водяной бане или в струе пара в течение 10 мин. НЕ АВТОКЛАВИРОВАТЬ СРЕДУ. Перегревание ухудшает свойства среды. Если большое количество селенита восстановилось (что видно по количеству красного преципитата на дне пробирки или флакона), среда не подлежит использованию.

Предупреждение: Селенит натрия очень токсичен, обладает коррозивной активностью и тератогенным действием, поэтому с ним надо обращаться очень осторожно. При попадании на кожу этот участок надо обильно промыть водой.

Принцип и оценка результата:

Впервые избирательный подавляющий эффект селенита показал Klett (1). Guth (2) использовал его для выделения возбудителя брюшного тифа. Изучая селенит, Лейфсон составил питательную среду (3), которая затем была дополнена цистином (4). Приведенная пропись соответствует рекомендациям АОАС (5) для определения сальмонелл в пищевых продуктах, особенно яичных. Ее рекомендуют также для выделения сальмонелл другие официальные документы (6, 7, 8, 9). Этот бульон полезен для обнаружения небольших концентраций сальмонелл в материале, например, от микробоносителей, реконвалесцентов, при эпидемиологических исследованиях (10).

Гидролизат казеина является источником азотистых питательных веществ. Лактоза поддерживает рН среды, так как бактерии восстанавливают селенит, защелачивая ее. Повышение значений рН ослабляет токсическое действие селенита на сопутствующую флору, которая может размножаться и затруднять выделение сальмонелл. Разложение лактозы ферментирующими ее микроорганизмами снижает рН до нейтральных значений. Фосфат поддерживает рН на заданном уровне и также способствует сохранению токсического действия селенита на сопутствующую микрофлору. L-цистин также способствует выделению сальмонелл. После обогащения в бульоне материал высевают на плотную среду. Бульон не рекомендуют инкубировать более 24 ч, т.к. после 6-12 ч подавляющий эффект селенита ослабевает (11).

Контроль качества:

Внешний вид порошка:

Гомогенный сыпучий порошок кремового цвета.

Цвет и прозрачность готовой среды:

Готовая среда имеет светло-желтую окраску, прозрачна или слегка опалесцирует.

Кислотность среды:

При 25°С водные растворы М025А (2,3% вес/об) или М025I (1,7% вес/об) имеют рН 7,0 ± 0,2.

Культуральные свойства:

Ростовые характеристики референс-штаммов через 18-24 ч при 35-37°С с последующим субкультивированием на агаре МакКонки (М081).

Штаммы микроорганизмов (АТСС)
Выделение
Цвет колоний
Escherichia coli (25922)
Отсутствует или мало
Белые или розовые с преципитатом
Salmonella typhimurium (14028)
Обильное
Бесцветные
Salmonella choleraesuis (12011)
Обильное
Бесцветные
Salmonella typhi (6539)
Обильное
Бесцветные

Ссылки:

1. Klett A., 1900, Zeitsch Fer Hyg. Und. Infekt, 33: 137.
2. Guth F., 1916, Zbl. Bakt. I. Orig., 77:487.
3. Leifson E., 1936, Am. J. Hyg., 24(2) : 423.
4. North W.R. and Bartram M.T., 1953, Appl. Microbiol., 1:130.
5. AOAC, 1978, Bacteriological Analytical Manual,5th ed., AOAC, Washington,DC.
6. Vanderzant C. and Splittstoesser D. (Eds.), 1992, Compendium of Methods for the Microbiological Examination of Foods, 3rd ed., APHA, Washington,DC.
7. APHA, 1992, Standard Methods for the Examination of Dairy Products, 16th ed., APHA Inc., Washington, D.C.
8. United States Pharmacopoeia, 2002, USP 25/NF 20, Asian Edition, U. S. Pharmacopeial Convention, Inc., Rockville, MD.
9. International Organization for Standardization (ISO), 1993, Draft ISO/DIS 6579.
10. Kelly, Brenner and Farmer, 1985, Manual of Clinical Microbiology, 4th ed., Lennett et al. (Eds.), ASM, Washington, D.C.
11. Chattopadhyay W. and Pilford J. N., 1976, Med.Lab. Sci., 33:191.

Условия и сроки хранения:

Порошок хранить при температуре ниже +25°С. Использовать до даты, указанной на этикетке. Готовую среду хранить при температуре +2…8°С.