Blood Agar Base Основа кровяного агара	М073
Blood Agar Base with low pH Основа кровяного агара слабокислого	M089

 

Эту среду после добавления крови можно использовать для выделения и культивирования притязательных микроорганизмов, в том числе таких возбудителей инфекций, как стрептококки и нейссерии.

Blood Agar Base (M073) Рост Streptococcus pyogenes

 

Состав**:

Ингредиенты	М073 грамм/литр	М089 грамм/литр
Настой говяжьего сердца	500,00	500,00
Триптоза	10,00	10,00
Натрия хлорид	5,00	5,00
Агар-агар	15,00	15,00
Конечное значение рН (при 25°С)	7,3 ± 0,2	6,8 ± 0,2

** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам

Приготовление:

Размешать 40,0 г порошка в 1000 мл дистиллированной воды. Прокипятить для полного растворения частиц. Стерилизовать автоклавированием при 1,1 атм (121°С) в течение 15 мин. Остудить до 50°С и асептично внести до 5% стерильную дефибринированную кровь. Тщательно перемешать и разлить среду в чашки Петри.

Принцип и оценка результата:

Эти среды с настоем сердца используют в качестве основы для приготовления кровяного агара. Основа М073 высокопитательна и может использоваться без добавления крови в качестве среды общего назначения. Так, ее применяли для исследования облученных клеток Escherichia coli (1), фагов Clostridium perfringens (2). Ее можно использовать для изучения фосфатазы стафилококков (3), после добавления соли и агара – для оценки микробной контаминации оборудования и свиных туш (4) или определения галотолерантности морских флавобактерий (5). Эту среду применяли для получения антигенов Salmonella typhi (6). Ее можно обогатить внесением крови или сыворотки. После добавления крови она подходит для определения гемолитических реакций, но результат зависит от видовой принадлежности крови. Так, баранья кровь дает наилучшие результаты для тестирования стрептококков группы А (7). При использовании лошадиной крови колонии Haemophilus haemolyticus дают гемолиз, как и колонии Streptococcus pyogenes (8). Norton (9) установил, что слабокислые значения рН (6,8 ± 0,2) помогают различать гемолитические реакции и способствуют росту на данной среде пневмококков и других стрептококков. Низкие значения рН помогают стабилизировать эритроциты, в результате чего формируются четкие зоны гемолиза.

Контроль качества:

Внешний вид порошка:

Гомогенный сыпучий желтый порошок.

Цвет и прозрачность готовой среды:

Основа среды имеет светло-янтарную окраску, прозрачна или слегка опалесцирует при затвердевании. После добавления крови среда должна иметь вишнево-красный цвет и опалесцирует, если в чашках Петри формируется гель.

Кислотность среды:

При 25°С водный раствор М073 (4,0% вес/об) имеет рН 7,3 ± 0,2; водный раствор М089 (4,0% вес/об) имеет рН 6,8 ± 0,2.

Культуральные свойства:

Ростовые характеристики референс-штаммов через 18-48 ч при 35-37°С.

Штамм микроорганизмов (АТСС)	Основа	Кровяной агар	Гемолиз
Neisseria meningitidis (13090)	Обильный	Обильный	–
Staphylococcus aureus (25923)	Обильный	Обильный	Бета
Staphylococcus epidermidis (12228)	Обильный	Обильный	–
Streptococcus pneumoniae (6303)	Средний или хороший	Обильный	Альфа
Streptococcus pyogenes (19615)	Средний или хороший	Обильный	Бета

Ссылки:

1. Alper T. and Gillies N.E., 1960, J. Gen. Microbiol., 22:113.
2. Williams H., 1959, J. Gen. Microbiol., 21:622.
3. Noble W.C., 1962, J. Clin, Path., 15:552.
4. Hansen N.H., 1962, J. Appl. Bact., 25:46.
5. Hayes P.R., 1963, J. Gen. Microbiol., 30:1.
6. Schuber J.H., Edwards P.R. and Ramsere C.H., 1969, J. Bacteriol., 77:648.
7. Snavely J.G. and Brahier J., 1960, Am. J. Clin. Pathol., 33:511.
8. Facklam R.R., 1980, Manual of Clinical Microbiology, Lennette and others (Eds.), 3rd ed., A.S.M., Washington, D.C.
9. Norton, 1932, J. Lab. Clin. Med., 17:558.

Условия и сроки хранения:

Порошок хранить при температуре ниже +25°С. Использовать до даты, указанной на этикетке. Готовую среду хранить при температуре +2…8°С.