Brucella Agar Base
Основа агара для бруцелл |
M074
|
Brucella Broth Base Основа бульона для бруцелл |
M348 |
Эти среды являются основой, которую, после внесения специальных добавок, рекомендуют для обогащения, выделения и культивирования видов бруцелл из клинического и другого материала.
Ингредиенты
|
M074
грамм/литр |
M348
грамм/литр |
Гидролизат казеина
|
10,00
|
10,00
|
Пептический перевар животной ткани
|
10,00
|
10,00
|
Дрожжевой экстракт
|
2,00
|
2,00
|
Глюкоза
|
1,00
|
1,00
|
Натрия хлорид
|
5,00
|
5,00
|
Натрия бисульфит
|
0,10
|
0,10
|
Агар-агар
|
15,00
|
–
|
Конечное значение рН (при 25°С) 7,0 ± 0,2
|
** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам
Размешать 21,55 г порошка М074 или 14,05 г порошка М348 в 500 мл дистиллированной воды. Подогреть до кипения для полного растворения частиц. Стерилизовать автоклавированием при 1,1 атм (121°С) в течение 15 мин. Остудить до 45-60°С, добавить (до 5% об/об) стерильную инактивированную лошадиную сыворотку (RM1239), для инактивации сыворотку прогревают при 56°С в течение 30 мин) и растворенное в воде содержимое 1 пузырька с селективной добавкой для бруцелл (FD161). Для выделения видов кампилобактеров к 500 мл М074 добавляют растворенное в воде содержимое 1 пузырька с селективной добавкой для кампилобактеров (FD009) и дефибринированную баранью кровь (до 5-7% об/об). Тщательно перемешивают и разливают в стерильные чашки Петри или пробирки.
Эти среды разработаны для получения обильного роста таких прихотливых микроорганизмов, как бруцеллы, стрептококки (в т.ч. пневмококки), Neisseria meningitidis и Haemophilus influenzae (1).
Пептический перевар животной ткани и гидролизат казеина предназначены для снабжения микроорганизмов азотистыми органическими соединениями, а дрожжевой экстракт также в качестве основного источника витаминов группы В. Глюкоза играет роль источника энергии. Среду можно обогатить путем добавления стерильной дефибринированной лошадиной крови (до 5% об/об). Для выделения бруцелл к основе добавляют смесь антибиотиков (2, 3, 4). Высокоселективную среду с антибиотиками предложили Farrel и Robinson (5). Первоначально предложенные этилвиолет и циркулин (6) больше не применяются. Если необходима неселективная среда, можно к основе бульона для бруцелл добавить только сыворотку (без внесения антибиотиков). Это предполагается в том случае, если одна половина пробирок с данным бульоном будет инкубироваться в нормальной атмосфере, а другая – в атмосфере, содержащей 10% углекислоты. Следует отметить, что бруцеллы являются возбудителями особо опасной инфекции и требуют соответствующего обращения. Все выросшие на этих средах предположительно анаэробные микроорганизмы надо подвергать дальнейшей идентификации.
Гомогенный сыпучий желтый порошок.
Образуется среда, соответствующая по плотности 1,5%-ному (М074) агаровому гелю.
Готовая среда имеет желтую окраску, прозрачна или слегка опалесцирует, если в чашках Петри или пробирках формируется гель.
При 25°С водные растворы М074 (4,30% вес/об) или М348 (2,81% вес/об) имеют рН 7,0 ± 0,2.
Ростовые характеристики референс-штаммов через 24-72 ч при 35°С в присутствии 10% СО2.
Штаммы микроорганизмов (АТСС)
|
Рост
|
Brucella abortus (4315)
|
Обильный
|
Brucella melitensis (4309)
|
Обильный
|
Brucella suis (4314)
|
Обильный
|
Escherichia coli (25922)
|
Подавляется
|
Staphylococcus aureus (25923)
|
Подавляется
|
1. Finegold et al (Ed.), 1990, Bailey and Scott’s Diagnostic Microbiology, 8th ed., The C.V. Mosby Co., St. Louis.
2. Jones L. M. and Brinley M.W.J., 1958, Bull. Wld. Hlth. Org., 19:200.
3. Kuzdas C.D., and Morse E.V., 1953, J. Bact., 66 (4):502.
4. Renoux G., 1954, Ann. Inst. Pasteur, 87 (3):325.
5. Farrell I.D. and Robinson L., 1972, J.Appl. Bact., 35:625.
6. Alton G.G. and Jones L.M., 1967, Lab Technique in Brucellosis WHO, Geneva.
Порошок хранить при температуре ниже +25°С. Использовать до даты, указанной на этикетке. Готовую среду хранить при температуре +2…8°С.