|
M-PA Agar Base
Основа М-агара для псевдомонад |
M1121
|
Эту среду используют для определения и выделения Pseudomonas aeruginosa мембранным методом.
|
Ингредиенты
|
грамм /литр
|
|
L-Лизина гидрохлорид
|
5,00
|
|
Натрия хлорид
|
5,00
|
|
Дрожжевой экстракт
|
2,00
|
|
Ксилоза
|
2,50
|
|
Сахароза
|
1,25
|
|
Лактоза
|
1,25
|
|
Железа аммонийного цитрат
|
0,80
|
|
Натрия тиосульфат
|
6,80
|
|
Феноловый красный
|
0,08
|
|
Агар-агар
|
15,00
|
|
Конечное значение рН (при 25°С) 7,1 ± 0,2
|
|
** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам
Размешать 39,68 г порошка в 1000 мл дистиллированной воды. Подогреть до кипения для полного растворения частиц. Стерилизовать автоклавированием при 1,1 атм (121°С) в течение 15 мин. Остудить до 50°С и асептично добавить (на 1000 мл среды) 176 мг сульфапиридина, 8,5 мг канамицина, 37,0 мг налидиксовой кислоты и 150 мг циклогексимида.
Тщательно перемешать и разлить в необходимом количестве в стерильные чашки Петри.
Эта среда приводится по прописи Levin и Cabelli (1), она рекомендована специалистами АРНА (2) для санитарно-микробиологических исследований воды и стоков методом мембранных фильтров. Методом бродильных проб успешно выделяют Pseudomonas aeruginosa, однако, при исследовании больших объемов воды этот метод не дает точных и воспроизводимых результатов. Проблему можно решить, используя метод мембранных фильтров. Первоначальную пропись среды позже несколько раз меняли разные авторы (2, 3).
L-Лизина гидрохлорид, дрожжевой экстракт и три углевода (лактоза, сазароза и ксилоза) служат источником углерода, азота, серы, минеральных веществ, витаминов и других факторов роста и энергии. Соли обеспечивают важнейшими ионами, а хлорид натрия поддерживает так же осмотическое давление. Феноловый красный является индикатором рН, который в кислой среде становится желтым. Канамицин и налидиксовая кислота подавляют рост грамположительных и грамотрицательных бактерий, соответственно. Канамицин нарушает синтаз белка, а налидиксовая кислота блокирует репликацию ДНК в бактериальной клетке (4). Циклогексимид подавляет рост грибов.
Гомогенный сыпучий розовый порошок.
Образуется среда, соответствующая по плотности 1,5%-ному агаровому гелю.
Среда имеет оранжево-красную окраску, слегка опалесцирует, если в чашках Петри формируется гель.
При 25°С водный раствор (3,97% вес/об) имеет рН 7,1 ± 0,2.
Ростовые характеристики референс-штаммов через 72 ч при 41,5±0,5°С.
|
Штаммы микроорганизмов (АТСС)
|
Рост*
|
Цвет среды
|
|
Pseudomonas aeruginosa (27853)
|
Хороший
или обильный |
Розовый
|
|
Escherichia coli (25922)
|
Подавляется
|
–
|
|
Klebsiella pneumoniae (13883)
|
Подавляется
|
–
|
|
Salmonella typhi (6539)
|
Подавляется
|
–
|
|
Staphylococcus aureus (25923)
|
Подавляется
|
–
|
Примечание: * - после добавления сульфапиридина, канамицина и налидиксовой кислоты
1. Levin and Cabelli, 1972, Appl. Microbiol., 24:864.
2. Carson, Peterson, Favero, et al, 1975, Appl. Microbiol., 30:935.
3. Dutka and Kwan, 1977, Appl. Microbiol., 33:240.
4. Estevez, 1984, Lab. Med. 15:258.
5. Greenberg A. E., Trussell R. R. and Clesceri L. S. (Eds.), 1995, Standard Methods for the Examination of Water and Wastewater, 19th ed., APHA, Washington, D.C.
Порошок хранить при температуре ниже +25°С. Использовать до даты, указанной на этикетке. Готовую среду хранить при +2…8°С.