Vibrio Parahaemolyticus Sucrose Agar
Сахарозный агар для вибрионов |
М1153
|
Этот агар используют для выделения и подсчета Vibrio parahaemolyticus из морепродуктов.
Ингредиенты
|
грамм /литр
|
Триптоза
|
5,00
|
Гидролизат казеина
|
5,00
|
Дрожжевой экстракт
|
7,00
|
Сахароза
|
10,00
|
Натрия хлорид
|
30,00
|
Смесь желчных кислот
|
1,50
|
Бромтимоловый синий
|
0,025
|
Агар-агар
|
15,00
|
Конечное значение рН (при 25°С) 8,6 ± 0,2
|
|
** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам
Размешать 73,52 г порошка в 1000 мл дистиллированной воды. Подогреть до кипения для полного растворения частиц. Стерилизовать автоклавированием при 1,1 атм (121°С) в течение 15 мин. Разлить в стерильные чашки Петри.
Этот агар рекомендован АРНА (1) для выделения и подсчета Vibrio parahaemolyticus из морепродуктов. Он является дифференцирующим (и в определенном смысле селективным): на нем можно отличить Vibrio parahaemolyticus от других морских вибрионов. Эту среду используют на последнем этапе исследования с применением гидрофобно-сетчатых фильтров (2).
Испытуемый морепродукт после смешивания со стерильным пептонно-солевым раствором с твином пропускают через гидрофобно-сетчатый фильтр, который затем асептично переносят на Триптонно-соевый солевой агар с сульфатом магния в чашках и инкубируют 4 ч при 35°С. После этого фильтр переносят на данный агар и инкубируют 18-20 ч при 42°С.
Триптоза, гидролизат казеина и дрожжевой экстракт служат источником азотистых питательных веществ, углерода, серы, витаминов группы В и микроэлементов, необходимых для роста указанных вибрионов. Сахароза является источником ферментируемых углеводов. Бромтимоловый синий – индикатор рН. Смесь желчных кислот подавляет рост грамположительных микроорганизмов. Высокая концентрация соли и щелочное значение рН соответствуют потребностям морских вибрионов и облегчают их выделение. Vibrio parahaemolyticus не ферментируют сахарозу, образуя зеленые или голубые колонии. Ферментирующие сахарозу Vibrio образуют желтые колонии.
Гомогенный сыпучий желтый порошок.
Образуется среда, соответствующая по плотности 1,5%-ному агаровому гелю.
Среда имеет синюю окраску, прозрачна или слегка опалесцирует, если в чашках Петри формируется гель.
При 25°С водный раствор (7,35% вес/об) имеет рН 8,6 ± 0,2.
Ростовые характеристики референс-штаммов через 18-24 ч при 42°С.
Штаммы микроорганизмов (АТСС)
|
Рост
|
Цвет колоний
|
Vibrio parahaemolyticus (17802)
|
Обильный
|
Сине-зеленые
|
Staphylococcus aureus (25923)
|
Подавляется
|
–
|
1. Vanderzant C. and Splittstoesser D. (Eds.), 1992, Compendium of Methods for the Microbiological Examination of Foods, 3rd ed., APHA, Washington, D.C.
2. Entis P. and Boleszczuk P., 1983, J. Food Prot., 46:783.
Порошок хранить при температуре ниже +25°С. Использовать до даты, указанной на этикетке. Готовую среду хранить при температуре +2…8°С.