Hemorrhagic Coli (HC) Agar
Агар для энтерогеморрагических эшерихий (ЭГКП) |
М1158
|
Этот агар в качестве дифференциальной среды рекомендуют для выделения и подсчета (например, методом энзим-меченых антител) энтерогеморрагических Escherichia coli.
Ингредиенты
|
грамм /литр
|
Гидролизат казеина
|
20,00
|
Сорбит
|
20,00
|
Натрия хлорид
|
5,00
|
Соли желчных кислот
|
1,12
|
Бромкрезоловый пурпурный
|
0,015
|
Агар-агар
|
15,00
|
Конечное значение рН (при 25°С) 7,2 ± 0,2
|
|
** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам
Размешать 61,13 г порошка в 1000 мл дистиллированной воды. Подогреть до кипения для полного растворения частиц. Стерилизовать автоклавированием при 1,1 атм (121°С) в течение 15 мин.
Этот агар готовят согласно прописи, рекомендованной специалистами АРНА (1), для выделения энтерогеморрагических Escherichia coli – возбудителей геморрагического колита (2).
Для посева гомогенизируют 10,0 г пробы в 90 мл пептонной воды (М028). После пропускания через фильтр с размером пор 100 мкм по 1 мл фильтрата вносят в 10 мл Пептонной воды и фильтруют через гидрофобный мембранный фильтр (HGMF). Укладывают данный фильтр на поверхность агара для ЭГКП и инкубируют при 43°С в течение 16-20 ч. Методом реплики переносят материал на новый фильтр HGMF и инкубируют фильтры в тех же условиях. Через 16-20 ч исходный фильтр тестируют конъюгатом моноклональных антител к антигенам ЭГКП. Проверяют также чистые культуры, обладающие Н-антигеном.
Гомогенный сыпучий желтый порошок.
Образуется среда, соответствующая по плотности 1,5%-ному агаровому гелю.
Готовая среда имеет лиловую окраску, прозрачна или слегка опалесцирует, если в пробирках формируется гель.
При 25°С водный раствор (6,11% вес/об) имеет рН 7,2 ± 0,2.
Ростовые характеристики референс-штаммов через 16-20 ч при 43°С.
Штаммы микроорганизмов (АТСС)
|
Рост
|
Escherichia coli (О157:Н7)
|
Обильный
|
Escherichia coli (25922)
|
Хороший
|
1. Vanderzant C. and Splittstoesser D. (Eds.), 1992, Compendium of Methods for the Microbiological Examination of Foods, 3rd ed., APHA, Washington, D.C.
2. Riley L.W. et al., 1983, N. Engl. J. Med., 308:681.
Порошок хранить при температуре ниже +25°С. Использовать до даты, указанной на этикетке. Готовую среду хранить при температуре +2…8°С.