CPC Agar Base
Основа селективного агара для вибрионов (с целлобиозой) |
М1241
|
Среду используют для культивирования и идентификации вибрионов из пищевых продуктов.
Ингредиенты
|
грамм/литр
|
Пептический перевар животной ткани
|
10,00
|
Мясной экстракт
|
5,00
|
Целлобиоза
|
15,00
|
Натрия хлорид
|
20,00
|
Бромтимоловый синий
|
0,04
|
Крезоловый красный
|
0,04
|
Агар-агар
|
15,00
|
Конечное значение рН (при 25°С) 7,6 ± 0,2
|
|
** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам
Размешать 32,54 г порошка в 500 мл дистиллированной воды. Подогреть до кипения для полного растворения частиц. Стерилизовать автоклавированием при 1,1 атм (121°С) в течение 15 мин. Остудить до 45°С и асептично добавить восстановленное содержимое 1 флакона с селективной добавкой (FD110). Тщательно перемешать.
Основа агара с целлобиозой, полимиксином и колистином (CPC) предложена специалистами АРНА (1) для культивирования и идентификации вибрионов из пищевых продуктов. Эта среда является селективной и дифференциальной, на которой первоначально предлагалось дифференцировать Vibrio vulnificus от других вибрионов (1). Штаммы Vibrio cholerae (кроме штаммов 01 классического биовара) растут на этой среде, а штаммы Vibrio parahaemolyticus – не растут.
Среда содержит мясной экстракт и пептический перевар животной ткани, которые дают необходимые питательные вещества для роста вибрионов. Целлобиоза служит субстратом для ферментирования. Некоторые вибрионы при разложении целлобиозы образуют кислые продукты, что приводит к пожелтению индикатора бромтимолового синего. Индикатор крезоловый красный имеет точку перехода в щелочной зоне и при щелочении среды становится красным. Щелочные значения рН способствуют выделению культур вибрионов.
Приготовленные чашки со средой подсушивают. Материал из верхней части щелочной пептонной воды (М618) или забуференного солевого бульона с желатином наносят на поверхность среды петлей штрихами. Инкубируют чашки при 40-42°С в течение 18-24 ч.
Ввиду того, что среда содержит два индикатора (бромтимоловый синий и крезоловый красный), колонии Vibrio cholerae обычно имеют вид мелких, гладких, непрозрачных зеленого или лилового цвета. При длительном инкубировании сама среда тоже становится лилового цвета.
Гомогенный сыпучий светло-коричневый порошок.
Образуется среда, соответствующая по плотности 1,5%-ному агаровому гелю.
Готовая среда имеет оливково-зеленую или светло-коричневую окраску, прозрачна или слегка опалесцирует, если в чашках Петри формируется гель.
При 25°С водный раствор (5,0% вес/об) имеет рН 7,6 ± 0,2.
Ростовые характеристики референс-штаммов через 18-24 ч при 40 ± 2°С.
Штаммы микроорганизмов (АТСС)
|
Рост
|
Цвет колоний
|
Vibrio cholerae (15748)
|
Хороший
или обильный |
Зеленые или лиловые
|
Vibrio parahaemolyticus (17802)
|
Подавляется
|
–
|
1. Vanderzant C. and Splittstoesser D. (Eds.), 1992, Compendium of Methods for the Microbiological Examination of Food, 3rd ed., APHA, Washington, D.C.
Порошок хранить при температуре ниже +25°С. Использовать до даты, указанной на этикетке. Готовую среду хранить при температуре +2…8°С.