Sauton’s Fluid Medium
Среда Сотона, жидкая |
M1276
|
Эту среду в соответствии с индийской Фармакопеей используют для культивирования и подсчета микобактерий.
Ингредиенты
|
грамм/литр
|
Железа аммонийного цитрат
|
0,0167
|
L-Аспарагин
|
1,330
|
Лимонная кислота
|
0,660
|
Магния сульфат
|
0,166
|
Калия гидрофосфат
|
0,287
|
Натрия дигидрофосфат
|
0,633
|
Натрия хлорид
|
0,400
|
Твин-80
|
0,833
|
Конечное значение рН (при 25°С) 7,2 ± 0,2
|
** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам
Размешать 4,32г порошка в 1000 мл дистиллированной воды, содержащей 20 мл глицерина. Прокипятить для полного растворения частиц. Стерилизовать автоклавированием при 1,1 атм (121°С) в течение 15 мин.
В соответствии с индийской Фармакопеей эту среду используют для определения числа КОЕ микобактерий в вакцинах BCG с известной активностью. Метод предполагает растворение лиофильно высушенной вакцины в исходном флаконе прилагаемым растворителем с последующим образованием пула из 5 растворенных таким образом вакцин. Из пула готовят 3 разведения на среде Сотона с таким расчетом, чтобы в 0,2 мл инокулюма содержалось 100, 400 и 20 КОЕ. По 0,2 мл из каждого указанного разведения высевают на поверхность скошенной среды Левенштейна-Йенсена и инкубируют посевы при 37 °С в течение 28 дней. Вакцину считают пригодной, если в 0,1 мл восстановленной вакцины содержится 1-33 (х105) КОЕ.
Соли типа цитрата аммонийного железа и сульфата магния необходимы для роста микобактерий в качестве источника неорганических ионов и азота. Аспарагин добавляют для стимуляции роста микобактерий.
Гомогенный сыпучий белый порошок.
Готовая среда бесцветна, прозрачна или слегка опалесцирует.
При 25°С водный раствор (0,43 % вес/об) имеет рН 7,2 ± 0,2.
Ростовые характеристики референс-штамма через 2 недели при 37 °С (а анаэробных условиях).
Штамм микроорганизмов (АТСС)
|
Рост
|
Mycobacterium smegmatis (14468)
|
Обильный
|
Mycobacterium tuberculosis (25177)
|
Обильный
|
1. Atlas R. M. (1993)Handbook of Microbiological Media, Parks L. (E d.), CRC Press, Inc.
2 . Indian Pharmacopoeia, 1996, volume II, the controller of Publications, Delhi, page 109-110.
Порошок хранить при температуре ниже +30°С. Использовать до даты, указанной на этикетке. Готовую среду хранить при температуре +2…8°С.