Хромогенный агар для обнаружения и подсчета E. coli
| HiCrome E. coli Agar Хромогенный агар для обнаружения и подсчета E. coli |
M1295/ M1295I |
HiCrome E.coli Agar рекомендуется для обнаружения и подсчета Escherichia coli в пищевых продуктах без дальнейшего подтверждения на мембранных фильтрах или реактивом на индол.
 |
Рост на среде HiCrome E. coli Agar (M1295)
|
 |
Рост на среде HiCrome E. coli Agar (M1295I)
|
Состав*:
|
Ингредиенты
|
M1295
грамм/литр |
M1295I
грамм/литр |
|
Ферментативный гидролизат казеина
|
14,00
|
20,00
|
|
Пептон специальный
|
5,00
|
-
|
|
Смесь солей желчных кислот
|
1,50
|
1,50
|
|
Натрия гидрофосфат
|
1,00
|
-
|
|
Калия дигидрофосфат
|
0,60
|
-
|
|
Натрия хлорид
|
2,40
|
-
|
|
Х-Глюкуронид
|
0,075
|
0,075
|
|
Агар-агар
|
12,00
|
15,00
|
Конечное значение рН (при 25°С) 7,2 ± 0.2
*Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам
Приготовление:
Размешать 36,58 г порошка M1295 или M1295I в 1000 мл дистиллированной воды. Стерилизовать автоклавированием при 1,1 атм (121°С) в течение 15 мин. Остудить до 50°С. Перемешать и разлить в стерильные чашки Петри.
Принцип и оценка результата:
HiCrome E. coli Agar готовится на основе желче-триптонного агара для быстрого и достоверного определения Escherichia coli в пищевых продуктах (1).
Большинство штаммов E. coli можно отличить от других колиформных бактерий по наличию глюкуронидазы, высоко специфичного для кишечной палочки фермента (2). Хромогенных субстрат X-глюкуронид, используемый в данной среде, позволяет выявить глюкуронидазную активность. Клетки Escherichia coli сорбируют X-глюкуронид, внутриклеточная глюкуронидаза расщепляет связь между глюкуронидом и хромофором, который, высвобождаясь, окрашивает колонии E. coli.
Ферментативный гидролизат казеина и специальный пептон удовлетворяют потребности бактерий в необходимых факторах роста. Соли желчных кислот подавляют рост грам-положительных микроорганизмов. Фосфаты поддерживают постоянный уровень рН среды, а хлористый натрий обеспечивает ее изотоничность.
Хорошо подсушите поверхность среды, разлитой в чашки. Приготовьте суспензию исследуемого пищевого продукта в 0.1% (вес/объем) пептонной воде (M028) в разведении 1:5 или 1:10 и тщательно гомогенизируйте. Распределите 0.5 мл - 1.0 мл гомогената по поверхности агара стеклянным стерильным шпателем и инкубируйте при 30°С в течение 4 ч, а затем при 44°С в течение 18 ч.
Данную среду следует применять только для диагностических целей in vitro. При работе с сухой средой надевайте маску и избегайте попадания среды в глаза.
Контроль качества:
Внешний вид порошка:
Гомогенный сыпучий порошок бежевого цвета.
Плотность готовой среды:
По плотности M1295 соответствует 1,2 %, а M1295I – 1,5 % агаровому гелю.
Цвет и прозрачность готовой среды:
В чашках Петри формируется прозрачный или слегка опалесцирующий гель светло-желтого цвета.
Кислотность:
При 25°С 3,66 %-й (вес/об) водный раствор имеет рН 7,2 ± 0.2.
Культуральные свойства:
Ростовые характеристики референс-штаммов через 18-24 ч при 44°С.
|
Штаммы микроорганизмов (ATCC)
|
Рост
|
Цвет колоний
|
|
Escherichia coli (25922)
|
Обильный
|
Синие
|
|
Salmonella серовар Enteritidis (13076)
|
Обильный
|
Бесцветные
|
|
Staphylococcus aureus (25923)
|
Рост отсутствует
|
-
|
Ссылки:
- Anderson J.M. and Baird-Parker A.C. 1975, J. Appl Bact., 39:111.
- Hansen W. and Yourassawsky E. 1984, J. Clin. Microbiol., 20:1117.
Условия и сроки хранения:
Хранить порошок при температуре ниже 8°С в плотно закрытой таре.
Использовать до даты, указанной на этикетке.