Fraser Broth Base
Основа бульона Фрейзера |
M1327
|
Этот бульон рекомендуется комитетом ISO для первичного и вторичного обогащения, выделения и подсчета Listeria monocytogenes в пищевых продуктах и кормах для животных.
Ингредиенты
|
грамм/
литр |
Пептон
|
5,00
|
Ферментативный гидролизат казеина
|
5,00
|
Дрожжевой экстракт
|
5,00
|
Мясной экстракт
|
5,00
|
Натрия хлорид
|
20,00
|
Натрия гидрофосфат (х2Н2О)
|
12,0
|
Калия дигидрофосфат
|
1,35
|
Эскулин
|
1,00
|
Лития хлорид
|
3,00
|
Конечное значение рН (при 25°С) 7,2 ± 0,2
|
** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам
Размешать 54,92 г порошка в 1000 мл дистиллированной воды. Подогреть (при необходимости) для полного растворения частиц. Стерилизовать автоклавированием при 1 атм (1210C) 15 минут. Остудить до 45-50°С и асептически добавить: для получения 1000 мл среды первичного обогащения - растворенное содержимое 1 флакончика с селективной добавкой Фрейзера (FD125I) и 2 флакончиков с добавкой Фрейзера (FD141); для получения 500 мл среды вторичного обогащения - по одному флакончику каждой добавки. Тщательно перемешать и разлить в стерильную посуду.
Примечание: Хлорид лития ядовит. Избегать контакта и вдыхания паров. При попадании на кожу немедленно обильно промыть ее водой.
Данная среда готовится по прописи Fraser и Sperber (1) с небольшой модификацией. Она рекомендована международным комитетом (ISO) для первичного и вторичного обогащения, выделения и подсчета Listeria monocytogenes в пищевых продуктах и кормах для животных. Различия состоят лишь в используемых добавках. Пептон, гидролизат казеина, мясной и дрожжевой экстракты используются в качестве источника углерода, азота, витаминов и минеральных веществ, хлорид лития подавляет рост энтерококков. Налидиксовая кислота акрифлавин повышают селективность среды, подавляя рост грамотрицательных и грамположительных микроорганизмов. Листерии гидролизуют эскулин до глюкозы и эскулетина, который, реагируя с цитратом аммонийного железа, образует комплексное соединение, окрашивающее среду в темно-коричневый или черный цвет.
Пробы засевают в среду первичного обогащения (с содержимым 1 флакончика добавки FD125I и 2 флакончиков добавки FD141 на 1000 мл среды) и инкубируют 24 ч при 30°C. Затем 0,1 мл культуральной жидкости переносят в среду вторичного обогащения (с содержимым 1 флакончика добавки FD125I и 1 флакончика добавки FD141 на 500 мл среды) и инкубируют 48 ч при 35-37°C. После обогащения культуры высевают на оксфордский агар и/или среду PALCAM для выделения и подсчета листерий.
Гомогенный сыпучий желтый порошок.
Готовая среда имеет желтую окраску, прозрачна. После внесения добавок раствор дает флюоресценцию и может содержать легкий преципитат.
При 25°С водный раствор (5,49% вес/об) имеет рН 7,2 ± 0,2.
Ростовые характеристики референс-штаммов через 24-48 ч при 35°С .
Штаммы микроорганизмов (АТСС)
|
Рост
|
Гидролиз эскулина*
|
Listeria monocytogenes (19112)
|
Хороший
или обильный |
+
|
Listeria monocytogenes (19111)
|
Хороший
или обильный |
+
|
Listeria monocytogenes (19118)
|
Хороший
или обильный |
+
|
Listeria monocytogenes (19117)
|
Хороший
или обильный |
+
|
Enterococcus faecalis (29212)
|
Подавляется
|
–
|
Escherichia coli (25922)
|
Подавляется
|
–
|
Staphylococcus aureus (25923)
|
Подавляется
|
–
|
Примечание: * почернение среды
1.Fraser J.A. and Sperber W.H., 1988, Food Protect., 51(10):762.
2.International Organisation for Standardization (ISO), 1996, ISO/DIS 11290-1.
Порошок хранить при температуре ниже +30°С. Использовать до даты, указанной на этикетке. Готовую среду хранить при температуре +2…8°С.