Reinforced Clostridial Agar
Обогащенный агар для клостридий |
M154
|
Reinforced Clostridial Broth Обогащенный бульон для клостридий |
M443 |
Эти среды используют для культивирования и подсчета видов Clostridium и других анаэробов.
Ингредиенты
|
М154
грамм/литр |
М443
грамм/литр |
Гидролизат казеина
|
10,00
|
10,00
|
Мясной экстракт
|
10,00
|
10,00
|
Дрожжевой экстракт
|
3,00
|
3,00
|
Глюкоза
|
5,00
|
5,00
|
Натрия хлорид
|
5,00
|
5,00
|
Натрия ацетат
|
3,00
|
3,00
|
Крахмал растворимый
|
1,00
|
1,00
|
L-Цистеина гидрохлорид
|
0,50
|
0,50
|
Агар-агар
|
13,50
|
0,50
|
Конечное значение рН (при 25°С) 6,8 ± 0,2
|
|
|
** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам
Размешать 51,0 г порошка М154 или 38,0 г порошка М443 в 1000 мл дистиллированной воды. Прокипятить для полного растворения частиц. Стерилизовать автоклавированием при 0,7 атм (115°С) в течение 15 мин.
Эта среда разработана Hirsch и Grinsted (1). Ее можно применять для получения роста максимального количества жизнеспособных клостридий при их минимальном содержании в исследуемом материале. Другие авторы (2) использовали бульонную среду для разведения инокулюма, содержащего вегетативные клетки Clostridium perfringens. Ее можно использовать для изучения спорообразующих анаэробов, в частности Clostridium butiricum, присутствующих в сыре, для подсчета клостридий методом разведений в пробирках или для приготовления чашек для выделения клостридий (3). На этих средах растут также другие спорообразующие анаэробы, стрептококки и лактобактерии. Эти среды имеют богатый состав, но не являются селективными.
Гидролизат казеина, мясной и дрожжевой экстракты, крахмал, L-цистеин и ацетат натрия обеспечивают присутствие питательных веществ, необходимых для роста клостридий. Глюкоза является ферментируемым субстратом. Хлорид натрия обеспечивает оптимальное осмотическое давление. Средам можно придать селективность путем добавления 15-20 мг (на 1 литр среды) полимиксина В (1).
Гомогенный сыпучий желтый порошок.
Образуется среда, соответствующая по плотности 1,35%-ному агаровому гелю (М154).
Среда имеет светло-желтую окраску, прозрачна или слегка опалесцирует, когда в пробирках или чашках Петри формируется гель.
При 25°С водные растворы М154 (5,1% вес/об) и М443 (3,8% вес/об) имеют рН 6,8 ± 0,2.
Ростовые характеристики референс-штаммов через 40-48 ч при 35°С в анаэробных условиях.
Штаммы микроорганизмов (АТСС)
|
Рост
|
Bacteroides fragilis (25745)
|
Хороший
или обильный |
Bacteroides vulgatus (8482)
|
Хороший
или обильный |
Clostridium butyricum (9690)
|
Хороший
или обильный |
Clostridium perfringens (13124)
|
Хороший
или обильный |
1. Hirsch and Grinsted, 1954, J. Dairy Res., 21:101.
2. Barnes and Ingram, 1956, J. Appl. Bact., 19:117.
3. Lewis and Angelotti (Eds.), 1964, Examination of Foods for Enteropathogenic and Indicator Bacteria, Dept. of HEW, PHS Publication, 1142, Washington.
Порошок хранить при температуре ниже +25°С. Использовать до даты, указанной на этикетке. Готовую среду хранить при температуре +2…8°С.