Kirschner Medium Base, Modified Основа среды Киршнера, модифицированная

М161

 

Основа среды Киршнера, с добавлением глицерина и лошадиной сыворотки, используется для культивирования Mycobacterium tuberculоsis.

Состав**:

Ингредиенты	грамм/ литр
Натрия гидрофосфат	3,00
Калия дигидрофосфат	4,00
Магния сульфат	0,60
Натрия цитрат	2,50
L–Аспарагин	5,00
Конечное значение рН (при 25°С) 7,4 ± 0,2

** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам

Приготовление:

Размешать 15,1 г порошка в 700 мл дистиллированной воды. Добавить 200 мл глицерина. Нагреть до кипения для полного растворения компонентов среды. Разлить по 9 мл в пробирки. Стерилизовать автоклавированием при 0,5 атм ( 115⁰С ) в течение 15 мин. Непосредственно перед использованием асептически добавить по 1 мл лошадиной сыворотки (Horse Serum FD074 или RM1239) и 100 ед бензилпенициллина в каждую пробирку.

Принцип и оценка результата:

Cреда Киршнера, основанная на прописи Лонга (1) и впоследствии модифицированная добавлением глицерина и лошадиной сыворотки, предназначенадля культивирования M.tuberculоsis. Среда широко используется в исследованиях активности противотуберкулезных препаратов, а также для дифференциации культур M.tuberculоsis, выделенных из патогенного материала.

Среда Киршнера содержит сильную буферную систему, поэтому вносить образцы можно без предварительной нейтрализации. L-Аспарагин поддерживает рост микобактерий, лошадиная сыворотка усиливает их рост, бензилпенициллин ингибирует рост сопутствующей флоры.

Контроль качества:

Внешний вид порошка:

Гомогенный сыпучий порошок белого цвета.

Цвет и прозрачность готовой среды:

Бесцветный раствор имеет слабый белый преципитат на дне.

Кислотность среды:

При 25⁰С водный раствор (1,51% вес/объем) имеет pH 7,4+0,2.

Культуральные свойства:

Ростовые характеристики референс-штаммов через 2-4 недели при 35-37°С.

Штаммы микроорганизмов (АТСС)	Рост
M.tuberculоsis H37 Rv (25618)	Обильный
M.smegmatis (14468)	Обильный
M.fortuitum (6841)	Обильный

Ссылки:

1. Bacer F.J. and Breach M.R., 1980, Medical Microbiological Tectniques, Butterworths and Co. Ltd.

Условия и сроки хранения:

Порошок хранить при температуре ниже 25°С. Использовать до даты, указанной на этикетке. Готовую среду хранить при температуре 2…8°С.