HiMedia: инструкция по применению продукции По всем вопросам обращаться: Почтовый адрес: 124498, Москва, а/я 130. Офис: 123007, Москва, Хорошевское шоссе, д. 13 а, кор.3. Тел/Факс: +7 (495) 940 33 12, 940 33 13, 940 33 14,940 33 96, 940 33 97, 940 33 98. E-mail: himedia@himedialabs.ru Наш сайт: www.himedialabs.ru
Cystine Heart Agar Сердечно-цистиновый агар Продукция зарегистрирована в Министерстве здравоохранения Российской Федерации (ФСЗ 2009/03707)		Кат. № M172

Эту среду с добавлением гемоглобина используют для культивирования Francisella tularensis. Без обогащающих добавок она способствует отличному росту грамотрицательных кокков и других, в том числе патогенных микроорганизмов.

Состав**:

Ингредиенты	г/л
Настой говяжьего сердца	500,00
Протеозопептон	10,00
Глюкоза	10,00
Натрия хлорид	5,00
L-цистин	1,00
Агар-агар	15,00
Конечное значение рН при 25оС	6,8 ± 0,2

** Состав выверен и доведен до соответствия необходимых параметров.

Приготовление а) без обогащения:

Размешайте 51,0 г порошка в 1000 мл дистиллированной воды. Нагрейте до кипения для растворения компонентов среды полностью.  Стерилизуйте автоклавированием при 1,1 атм. (121ºС) в течение 15 мин.

б) с обогащением:

1. Суспендируйте 10,2 г порошка в 100,0 мл дистиллированной воды. Тщательно перемешайте.

2. Нагрейте с частым перемешиванием до кипения до растворения компонентов среды полностью.

3. Автоклавируйте при 121 ° С в течение 15 минут. Охладите до 50° C.

4. Добавьте 100,0 мл стерильного 2% раствора гемоглобина и тщательно перемешайте, избегая образования пены.

• 2% раствор гемоглобина приготовьте следующим образом: Поместите 2,0 г порошка гемоглобина в сухую колбу. Добавьте 100,0 мл холодной дистиллированной воды при энергичном перемешивании. Продолжите прерывистое перемешивание в течение 10-15 минут до тех пор, пока гемоглобин раствориться полностью. Автоклавируйте при 121 ° С в течение 15 минут. Охладите до 50 ° С.

5. Внесите в стерильные чашки Петри или пробирки.

6. Испытайте образцы готового продукта с помощью стабильных, типичных контрольных культур.

Принцип и оценка результата:

Эта среда рекомендована специалистами АРНА (1) для культивирования Francisella tularensis. Francis (2) сообщил, что кровяно-цистиновый агар с глюкозой является хорошей питательной средой. Chaw (3) внес 0,05% цистина и 1% глюкозы в агаризованный настой сердца и получил среду для культивирования возбудителя туляремии. Rhamy (4), используя среду Francis, добавил в нее автоклавированный раствор гемоглобина и подтвердил пригодность такой среды для культивирования Francisella tularensis. Эта среда богата питательными веществами, которые позволяют использовать ее для культивирования многих других микроорганизмов, которые обычно трудно выращивать на питательных средах.

Контроль качества:

Внешний вид порошка:

Гомогенный сыпучий порошок бежевого цвета.

Плотность готовой среды:

Образуется среда, соответствующая по плотности 1,5%-ному агаровому гелю.

Цвет и прозрачность готовой среды:

Среда янтарного цвета, прозрачная с легкой опалесценцией. При добавлении гемоглобина среда приобретает коричнево-шоколадный цвет.

Кислотность среды:

При 25ºС водный раствор (5,1% вес/об) имеет рН 6,8 ± 0,2.

Культуральные свойства референс-штаммов через 40-48 ч при 35ºС с обогащением 2%гемоглобином.

Штаммы микроорганизмов (АТСС)	рост
Francisella tularensis 29684	обильный
Neisseria meningitidis 13090	обильный
Streptococcus pneumoniae 6303	обильный
Streptococcus pyogenes 19615	обильный

Условия и сроки хранения: хранить при температуре ниже +30ºС в плотно закрытом контейнере. Использовать до даты, указанной на этикетке. Готовую среду хранить при температуре +2…8ºС.

Источники литературы:

1. Murray P. R., Baron J. H., Pfaller M. A., Jorgensen J. H. and Tenover F. C., Yolken R. H., (Ed.), 1999, Manual of Clinical Microbiology, 7th Ed. American Society for Microbiology, Washington, D.C.

2. Francis, 1928, JAMA, 91:1155.

3. Shaw, 1930, Zentr. Bakt. I. Abt. Orig., 118:216.

4. Rhamy, 1933, Am. J. Clin. Pathol., 3:121.

5. Isenberg, (Ed.), 1992, Clinical Microbiology Procedures Handbook, Vol. 1. American Society for Microbiology, Washington, D.C.

6. U.S. Public Health Service, Centers for Disease Control and Prevention, and National Institutes of Health, 1999, Biosafetyin Microbiological and Biomedical Laboratories, 4th Ed., HHS Publication.