Dubos Oleic Agar Base
Основа агара с олеиновой кислотой для микобактерий (по Дюбо) |
M179
|
Эту среду используют для приготовления плотной среды, предназначенной для выращивания культур Mycobacterium tuberculosis в пробирках или чашках.
Ингредиенты
|
грамм/литр
|
Гидролизат казеина
|
0,50
|
L-Аспарагин
|
1,00
|
Калия дигидрофосфат
|
1,00
|
Натрия гидрофосфат
|
2,50
|
Железа аммонийного цитрат
|
0,05
|
Магния сульфат
|
0,01
|
Кальция хлорид
|
0,0005
|
Цинка сульфат
|
0,0001
|
Меди сульфат
|
0,0001
|
Агар-агар
|
15,00
|
Конечное значение рН (при 25°С) 6,6 ± 0,2
|
|
** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам
Размешать 4,0 г порошка в 180 мл дистиллированной воды. Прокипятить для полного растворения частиц. Стерилизовать автоклавированием при 1,1 атм (121°С) в течение 15 мин. Асептично добавить 20 мл стерильной добавки (FD020) и 5 000-10 000 ЕД пенициллина к 180 мл стерильной остуженной среды. Тщательно перемешать и разлить в стерильные пробирки или чашки.
Dubos и Middlebrook (1) описали агаровую среду для первичного выделения туберкулезной палочки и изучения морфологии ее колоний. Данная основа с добавлением альбумина и олеиновой кислоты является богатой средой для выделения туберкулезной палочки (2) и используется также для определения ее чувствительности к химиотерапевтическим препаратам.
Среда обогащена гидролизатом казеина и L-аспарагином. Широкий спектр неорганических солей является источником ионов, необходимых в метаболических процессах Mycobacterium tuberculosis. Добавляемая в среду олеиновая кислота служит источником жирных кислот для размножения микобактерий. Пенициллин подавляет рост многих бактерий. Эту среду готовят без добавления глицерина или глюкозы, чтобы не способствовать росту комменсалов.
Гомогенный сыпучий светло-желтый порошок.
Образуется среда, соответствующая по плотности 1,5%-ному агаровому гелю.
Готовая среда имеет светло-янтарную окраску, слегка опалесцирует и дает легкий преципитат, когда в пробирках или чашках формируется гель.
При 25°С водный раствор (2,0% вес/об) имеет рН 6,6 ± 0,2.
Ростовые характеристики референс-штаммов через 4-6 недель при 35-37°С.
Штаммы микроорганизмов (АТСС)
|
Рост
|
Характер колоний
|
Mycobacterium tuberculosis H37 Rv (25618)
|
Обильный
|
Плоские шероховатые сухие бесцветные
|
Mycobacterium kansasii (12478)
|
Обильный
|
Фотохромогенные плоские гладкие со слегка зернистой поверхностью и неровными краями
|
Mycobacterium gordonae (14470)
|
Обильный
|
Чаще гладкие оранжевые или желтые
|
Mycobacterium avium (25291)
|
Обильный
|
Гладкие тонкие непигментированные
|
Mycobacterium smegmatis (14468)
|
Обильный
|
Шероховатые или гладкие белые в виде купола
|
1. Dubos and Middlebrook, 1942, Am. Rev. Tuberculosis, 56:334.
2. Wallace and Erlich, 1950, Am. Rev. Tuberculosis, 61,563.
3. MacFaddin J., 1985, Media for Isolation-Cultivation-Identification-Maintenance of Medical Bacteria, Vol. I, Williams and Wilkins, Baltimore.
4. Finegold and Baron, 1990, Bailey and Scott’s ‘Diagnostic Microbiology’ 8th ed., The C.V. Mosby Co., St. Louis.
Порошок хранить при температуре ниже +25°С. Использовать до даты, указанной на этикетке. Готовую среду хранить при температуре +2…8°С.