Thioglycollate Medium without Indicator 135C
Тиогликолевая среда без индикатора 135С |
М191
|
Эта среда используется для культивирования широкого круга микроорганизмов, в частности облигатных анаэробов из клинического и другого материала.
Ингредиенты
|
грамм/
литр |
Гидролизат казеина
|
17,00
|
Папаиновый перевар соевой муки
|
3,00
|
Глюкоза
|
6,00
|
Натрия хлорид
|
2,50
|
Натрия тиогликолят
|
0,50
|
L-Цистин
|
0,25
|
Натрия сульфит
|
0,10
|
Агар-агар
|
0,70
|
Конечное значение рН (при 25°С) 7,0 ± 0,2
|
|
** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам
Размешать 30,0 г порошка в 1000 мл дистиллированной воды. Подогреть для полного растворения частиц. Разлить в соответствующую посуду. Стерилизовать автоклавированием при 1,1 атм (121°С) в течение 15 мин. Остудить среду в вертикальном положении. Для поддержания жизнеспособности культур перед заполнением контейнеров добавить в них небольшое количество карбоната кальция.
Данная среда является полужидкой средой, которую предложил Бревер (1) для выращивания аэробных и анаэробных микроорганизмов (2, 3). Первоначально в состав среды в качестве индикатора окислительно-восстановительного потенциала входил метиленовый синий, но теперь он исключен, чтобы можно было рано увидеть рост и снять возможные токсические эффекты индикатора. Облигатные анаэробы растут в верхней части среды, анаэробы – возле дна.
Среда питательна настолько, что позволяет выращивать при минимальном инокулюме Clostridium butyricum, Campylobacter spp., Bacteroides spp., пневмококков и др. При отсутствии индикатора на этой среде появляется возможность выращивать бруцелы. Если в состав среды ввести 10% сыворотки, на ней можно выращивать Trichomonas vaginalis. Если ее используют в качестве транспортной среды, к ней добавляют карбонат кальция. Последний нейтрализует образующуюся в ходе роста кислоту, предотвращая быстрый рост и гибель грамотрицательных кокков, Clostridium perfringens и других чувствительных к кислотам бактерий.
Гидролизат казеина, папаиновый перевар соевой муки, глюкоза и L-цистин служат источником азотистых питательных веществ, углерода, ферментируемых углеводов и микроэлементов, необходимых для роста микроорганизмов. Тиогликолят натрия играет роль редуцирующего вещества, которое поддерживает низкий окислительно-восстановительный потенциал среды. Небольшое количество агара помогает поддержать анаэробиоз.
Гомогенный сыпучий желтый порошок.
Среда имеет светло-янтарную окраску, слегка опалесцирует, вязкая.
При 25°С водный раствор (3,0% вес/об) имеет рН 7,0 ± 0,2.
Ростовые характеристики референс-штаммов через 18-48 ч при 35°С
Штаммы микроорганизмов (АТСС)
|
Рост
|
Bacillus subtilis (6633)
|
Хороший или обильный
|
Candida albicans (10231)
|
Хороший или обильный
|
Clostridium sporogenes (11437)
|
Хороший или обильный
|
Micrococcus luteus (10240)
|
Хороший или обильный
|
Neisseria meningitidis (13090)
|
Хороший или обильный
|
Streptococcus pyogenes (19615)
|
Хороший или обильный
|
Bacteroides vulgatus (8482)
|
Средний или слабый
|
1. Brewer, 1940, J.Bact., 35:10
2. Vera, 1944, J. Bact., 47:59.
3. Hansen, Price and Clements, 1952, J. Bact., 64:772.
Порошок хранить при температуре ниже +25°С. Использовать до даты, указанной на этикетке. Готовую среду хранить при температуре +2…8°С.