Casman Agar Base
Основа агара Казмена |
М201
|
Casman Broth Base Основа бульона Казмена |
М766 |
Эти среды с добавлением крови применяют для выделения в условиях пониженного парциального давления кислорода прихотливых микроорганизмов из клинического материала.
Ингредиенты
|
М201
грамм/литр |
М766
грамм/литр |
Протеозопептон
|
10,00
|
10,00
|
Триптоза
|
10,00
|
10,00
|
Мясной экстракт
|
3,00
|
3,00
|
Глюкоза
|
0,50
|
0,50
|
Крахмал кукурузный
|
1,00
|
1,00
|
Натрия хлорид
|
5,00
|
5,00
|
Никотинамид
|
0,05
|
0,05
|
Пара-аминобензойная кислота (ПАБК)
|
0,05
|
0,05
|
Агар-агар
|
14,00
|
–
|
Конечное значение рН (при 25°С)
|
7,3 ± 0,2
|
7,2 ± 0,2
|
** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам
Размешать 43,6 г порошка М201 или 29,6 г порошка М766 в 1000 мл дистиллированной воды. Подогреть до кипения для полного растворения частиц. Разлить в пробирки или флаконы и стерилизовать автоклавированием при 1,1 атм (121°С) в течение 15 мин. Остудить до 50°С и асептично добавить стерильную 5%-ную кровь (лизированную водой при соотношении вода:кровь = 3:1) до конечной концентрации 0,15%. Тщательно перемешать и разлить в соответствующие емкости.
Представители родов Haemophilus и Neisseria являются прихотливыми микроорганизмами и нуждаются в дополнительных факторах роста. Данные среды, обогащенные кровью, описал Casman (1, 2, 3) для культивирования гонококков и гемофильных палочек, заменив ими среды с мясным настоем, свежей и гретой кровью и т.д.
Протеозопептон, триптоза и мясной экстракт дают аминокислоты и другие сложные питательные вещества. Глюкоза улучшает рост патогенных кокков. Кукурузный крахмал предупреждает подавляющее действие жирных кислот на Neisseria gonorrhoeae без влияния на гемолиз, но с нейтрализацией подавляющей активности глюкозы. С кровью в среду вносятся необходимые факторы роста гемофильных бактерий: гемин (фактор Х) и никонинамидадениндинуклеотид (НАД, фактор V). Предпочтительно для этой цели использовать лошадиную или кроличью кровь, т.к. в них относительно мало фермента, разрушающего НАД (4). С целью предотвращения разрушения НАД в среду добавляется и никотинамид.
Посев рекомендуется делать сразу после доставки материала в лабораторию. После инкубирования Haemophilus influenzae образуют на данной среде бесцветные или серые колонии с характерным “мышиным” запахом, Neisseria gonorrhoeae формируют маленькие бесцветные или серовато-белые колонии.
Гомогенный сыпучий светло-желтый порошок.
Образуется среда, соответствующая по плотности 1,4%-ному агаровому гелю (М201).
Основа среды имеет желтую окраску, прозрачна или слегка опалесцирует. После добавления крови среда становится вишнево-красного цвета и опалесцирует, если в чашках Петри или пробирках формируется гель.
При 25°С водный раствор М201 (4,36% вес/об) имеет рН 7,3 ± 0,2, М766 (2,96% вес/об) имеет рН 7,2 ± 0,2.
Ростовые характеристики референс-штаммов через 40-48 ч при 35°С.
Штамм микроорганизмов (АТСС)
|
Рост
|
Гемолиз
|
Haemophilus influenzae (35056)
|
Хороший
или обильный |
Нет
|
Neisseria meningitidis (13090)
|
Обильный
|
Нет
|
Streptococcus pneumoniae (6303)
|
Обильный
|
Альфа
|
Streptococcus pyogenes (19615)
|
Обильный
|
Бета
|
Streptococcus mitis (9895)
|
Обильный
|
Бета
|
1. Casman, 1947, Am. J. Clin. Pathol., 17:281.
2. Casman, 1942, J. Bact., 43:33.
3. Casman, 1947, J. Bact., 53:561.
4. Krunveide and Kuttner, 1938, J. Exp. Med., 67:429.
Порошок хранить при температуре ниже +25°С. Использовать до даты, указанной на этикетке. Готовую среду хранить при температуре +2…8°С.