|
Anaerobic Agar
Анаэробный агар |
M228
|
Анаэробный агар рекомендуется для культивирования анаэробных бактерий, в частности, видов Clostridium и других микроорганизмов.
|
Ингредиенты
|
грамм/литр
|
|
Гидролизат казеина
|
20,00
|
|
Глюкоза
|
10,00
|
|
Натрия хлорид
|
5,00
|
|
Натрия тиогликолят
|
2,00
|
|
Натрия формальдегидсульфоксилат
|
1,00
|
|
Метиленовый синий
|
0,002
|
|
Агар-агар
|
20,00
|
|
Конечное значение рН (при 25°С) 7,2 ± 0,2
|
|
** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам
Размешать 58,0 г порошка в 1000 мл дистиллированной воды. Подогреть до кипения для полного растворения частиц. Разлить в необходимом количестве. Стерилизовать автоклавированием при 1 атм (121°С) в течение 15 мин.
Первоначально анаэробный агар был разработан для культивирования представителей рода Clostridium и других анаэробов на поверхности среды в чашках Петри (1). Эта среда подходит для выделения факультативных или облигатных анаэробов и изучения их колоний, так как последние хорошо видны и легко доступны на слегка окрашенном агаре.
Данная среда содержит тиогликолят натрия и формальдегидсульфоксилат натрия, которые обеспечивают достаточно низкий окислительно-восстановительный потенциал. Степень анаэробиоза контролируется по цвету индикатора (метиленового синего), который в присутствии кислорода синеет. Гидролизат казеина и глюкоза обеспечивают микроорганизмы необходимыми питательными веществами, а хлорид натрия поддерживает оптимальное осмотическое давление среды. В специальную анаэробную чашку размером 90 х 20 мм (Brewer Anaerobic Petri dish) вносят 50-60 мл среды. Чтобы получить сухую поверхность агара, лучше всего во время его затвердевания накрыть чашку пористой крышкой. Посев осуществляют штрихами или размазыванием материала. Засеянную чашку закрывают специальной крышкой и инкубируют в соответствующих анаэробных условиях. Если используются стандартные чашки, в них вносят 0,1-1,0 мл инокулюма, заливают 20-25 мл стерильной среды, перемешивают и, после затвердевания агара, инкубируют в анаэробных условиях в соответствии с потребностями изучаемого микроорганизма. Следует отметить, что метиленовый синий подавляет рост некоторых анаэробов.
Гомогенный сыпучий светло-желтый порошок.
Образуется полужидкая среда, соответствующая по плотности 2%-ному агаровому гелю.
Готовая среда имеет светло-янтарную окраску, прозрачна или слегка опалесцирует, если в чашках Петри формируется гель. При длительной аэрации среда зеленеет.
При 25°С водный раствор (5,8% вес/об) имеет рН 7,2 ± 0,2.
Ростовые характеристики референс-штаммов через 48-72 ч при 35°С в анаэробных условиях
|
Штаммы микроорганизмов (АТСС)
|
Рост
|
|
Clostridium butyricum (9690)
|
Обильный
|
|
Clostridium perfringens (12914)
|
Обильный
|
|
Clostridium sporogenes (11437)
|
Обильный
|
1. Brewer J.H., 1942, Science, 95:587.
Порошок хранить при температуре ниже +25°С. Использовать до даты, указанной на этикетке. Готовую среду хранить при температуре +2…8°С.