Mycoplasma Agar
Агар Микоплазма |
M266
|
Broth Base Основа Бульона Микоплазма |
M267 |
M268 |
Эти среды с обогащающей добавкой используют для выделения и культивирования микоплазм (PPLO).
Ингредиенты
|
М266
грамм/литр |
М267
грамм/литр |
М268
грамм/литр |
Настой говяжьего сердца
|
250,00
|
250,00
|
250,00
|
Пептический перевар животной ткани
|
10,00
|
10,00
|
10,00
|
Натрия хлорид
|
5,00
|
5,00
|
5,00
|
Кристаллический фиолетовый
|
–
|
–
|
0,01
|
Агар-агар
|
15,00
|
–
|
–
|
Конечное значение рН
(при 25°С) 7,8 ± 0,2 |
** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам
Размешать 36,0 г порошка М266 или 21,0 г порошков М267 или M268 в 1000 мл дистиллированной воды. Прокипятить до полного растворения частиц. Стерилизовать автоклавированием при 1,1 атм (121°С) в течение 15 мин. Остудить до 45°С и асептично добавить 1% стерильной лошадиной сыворотки (RM1239) и добавку Mycoplasma Supplement (FD075). Перед розливом среду тщательно перемешать. Для среды М268, помимо добавок RM1239 и FD075, ввести 2,85 мл 1%-ного раствора теллурита калия (FD052). Вместо лошадиной сыворотки можно использовать асцитическую жидкость.
Эти среды разработаны Morton и соавт. (1) и используются для выделения микоплазм из клинического материала (мокроты и др.), а также из смешанных культур. Компоненты среды и все добавки, используемые для культивирования микоплазм, не должны содержать токсических веществ, даже в малых количествах. Для хорошего роста многие микоплазмы нуждаются в добавлении сыворотки крови, а также присутствии антибиотика, препятствующего росту сопутствующих микроорганизмов. Кристаллический фиолетовый и теллурит калия подавляют рост многих грамположительных и грамотрицательных бактерий. Большинство видов микоплазм относятся к аэробам или факультативным анаэробам, но некоторые являются микроаэрофилами. Немногие микоплазмы являются анаэробными сапрофитами, которые лучше всего растут в диапазоне 22-35°С, патогенные штаммы – при 35°С. При росте на агаре микоплазмы образуют характерные колонии, врастающие в среду.
Чашки или пробирки со средой рекомендуется инкубировать в атмосфере 5-10% углекислого газа и учитывать результаты через 48 ч, а в случае отсутствия роста – в течение 3 недель.
Гомогенный сыпучий желтый порошок.
Образуется среда, соответствующая по плотности 1,5%-ному агаровому гелю (М266).
Среда имеет желтую окраску, прозрачна или слегка опалесцирует, если в чашках Петри или пробирках формируется гель.
При 25°С водные растворы М266 (3,6% вес/об), М267 или М268 (2,1% вес/об) имеют рН 7,8 ± 0,2.
Ростовые характеристики референс-штаммов через 48 ч при 35°С в атмосфере 10% углекислого газа.
Штаммы микроорганизмов (АТСС)
|
Рост
|
Рост*
|
Mycoplasma bovis (25523)
|
Хороший
или обильный |
Хороший
или обильный |
Mycoplasma gallinarium (19708)
|
Хороший
или обильный |
Хороший
или обильный |
Mycoplasma pneumoniae(15531)
|
Хороший
или обильный |
Хороший
или обильный |
Streptococcus pneumoniae (6303)
|
Хороший
или обильный |
Подавляется
|
Примечания: * с добавками кристаллического фиолетового и теллурита калия.
1. Morton, Smith and Leverman, 1951, Am. J. Syphilis Gonorrh. Veneral Diseases, 35 : 361.
Порошок хранить при температуре ниже +25°С. Использовать до даты, указанной на этикетке. Готовую среду хранить при температуре +2…8°С.