|
Coagulase Mannitol Agar Base
Основа дифференцирующего агара (с плазмой) для стафилококков |
М272
|
Среду с добавкой плазмы используют для выделения и дифференциации Staphylococcus spp. из патологического материала или для идентификации чистых культур.
|
Ингредиенты
|
грамм/литр
|
|
Настой мозга и сердца
|
5,00
|
|
Гидролизат казеина
|
10,50
|
|
Папаиновый перевар соевой муки
|
3,50
|
|
Натрия хлорид
|
3,50
|
|
Маннит
|
10,00
|
|
Бромкрезоловый пурпурный
|
0,02
|
|
Агар-агар
|
14,50
|
|
Конечное значение рН (при 25°С) 7,4 ± 0,2
|
|
** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам
Размешать 47,0 г порошка в 1000 мл дистиллированной воды. Прокипятить для полного растворения частиц. Стерилизовать автоклавированием при 0,9-1,1 атм (118-121°С) в течение 15 мин. Остудить до 45-50°С и асептично добавить до 7-15% (об/об) стерильную, предварительно проверенную, плазму. Тщательно перемешать и разлить в стерильные чашки Петри.
Эту среду используют для выделения и дифференциации Staphylococcus spp. из патологического материала или для идентификации чистых культур Staphylococcus aureus по способности коагулировать плазму и ферментировать маннит. Среду для селективного выделения и дифференциации стафилококков впервые предложил Chapman. Для селективного выделения стафилококков Zebovitz и соавт. (3) и Marwin (4) разработали теллурит-глициновую среду. Данная среда основана на прописи Esber и Faulconer (5). Старые или мутировавшие культуры Staphylococcus aureus могут проявлять слабую коагулазную активность. Их надо рассевать и повторно тестировать. Кишечные палочки тоже могут ферментировать маннит и давать слабую коагулазную активность. Образование коагулазы зависит от присутствия в среде ферментируемого сахара, в данном случае, маннита. Оно также зависит от наличия белка, имеющегося в плазме крови и настое мозга и сердца. В случае ферментации маннита среда вокруг колоний закисляется и индикатор бромкрезоловый пурпурный окрашивается в желтый цвет. Если микроорганизмы коагулируют плазму, вокруг их колоний образуется непрозрачная зона. Микроорганизмы вида Staphylococcus epidermidis являются коагулазоотрицательными и не ферментируют маннит, поэтому среда вокруг их колоний не изменяется. Коагулазоотрицательными видами маннит может ферментироваться с образованием желтой зоны, но она не будет мутной.
Гомогенный сыпучий светло-серый порошок.
Образуется среда, соответствующая по плотности 1,45%-ному агаровому гелю.
Готовая среда имеет лиловую окраску, слегка опалесцирует, если в чашках Петри формируется гель.
При 25°С водный раствор (4,7% вес/об) имеет рН 7,4 ± 0,2.
Ростовые характеристики референс-штаммов через 18-48 ч при 35-37°С.
|
Штаммы микроорганизмов (АТСС)
|
Рост
|
Маннит*
|
Коагулаза**
|
|
Staphylococcus aureus (25923)
|
Обильный
|
+
|
+
|
|
Staphylococcus epidermidis (12228)
|
Обильный
|
–
|
–
|
Примечание:
* "+" - желтый цвет; "–" - лиловый цвет;
** "+" - непрозрачная (мутная) зона вокруг колоний.
1. Kloos and Jorgensen, 1985, In Manual of Clinical Microbiology, Lennett, Balows, Hausler and Shadomy (Eds.), 4th ed., ASM, Washington, D.C.
2. Chapman, 1946, J. Bact., 51:409.
3. Zebovitz, Evans and Nivens, 1955, J. Bact., 70:686.
4. Marwin, 1958, Am. J. Clin. Pathol., 30:470.
5. Esber and Faulconer, 1959, Am. J. Clin. Pathol., 32:192.
Порошок хранить при температуре ниже +25°С. Использовать до даты, указанной на этикетке. Готовую среду хранить при температуре +2…8°С.