Фенилаланиновый агар
|
Phenylalanine Agar
Фенилаланиновый агар |
M281
|
Этот агар используют для дифференциации протеев и провиденций от других энтеробактерий по их способности образовывать из фенилаланина фенилпировиноградную кислоту.
 |
Тест на фенилаланиндезаминазу на среде Phenylalanine Agar (M281), слева направо:
|
Состав**:
|
Ингредиенты
|
грамм/литр
|
|
Дрожжевой экстракт
|
3,00
|
|
Натрия хлорид
|
5,00
|
|
DL-фенилаланин
|
2,00
|
|
Натрия гидрофосфат
|
1,00
|
|
Агар-агар
|
15,00
|
|
Конечное значение рН (при 25°С) 7,3 ± 0,2
|
|
** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам
Приготовление:
Размешать 26,0 г порошка в 1000 мл дистиллированной воды. Прокипятить для полного растворения частиц. Разлить в пробирки. Стерилизовать автоклавированием при 1,1 атм (121°С) в течение 15 мин. Остудить в наклонном положении для формирования скоса.
Принцип и оценка результата:
Этот агар разработан Юингом и соавт. (1). Морганеллы, протеи и провиденции способны дезаминировать фенилаланин с образовыванием фенилпировиноградной кислоты (2), что имеет важное значение для дифференциации энтеробактерий (3).
Дрожжевой экстракт обеспечивают среду необходимыми веществами для роста микроорганизмов. DL-фенилаланин является субстратом для ферментации, из которого на воздухе образуется фенилпировиноградная кислота. При положительной реакции после нанесения на микробный рост нескольких капель 10%-ного раствора хлорида железа развивается зеленое окрашивание. При отрицательной реакции цвет среды и роста не меняется. Результат учитывают в течение 5 минут после нанесения реактива, т.к. зеленый цвет быстро бледнеет (3, 4).
Контроль качества:
Внешний вид порошка:
Гомогенный сыпучий светло-желтый порошок.
Плотность готовой среды:
Образуется среда, соответствующая по плотности 1,5%-ному агаровому гелю.
Цвет и прозрачность готовой среды:
Среда имеет светло-янтарную окраску, слегка опалесцирует, если в пробирках формируется гель.
Кислотность среды:
При 25°С водный раствор (2,6% вес/об) имеет рН 7,3 ± 0,2.
Культуральные свойства:
Ростовые характеристики референс-штаммов через 18-24 ч при 35°С.
|
Штаммы микроорганизмов (АТСС)
|
Рост
|
Фенилаланиндезаминаза
|
|
Enterobacter aerogenes (13048)
|
Обильный
|
–
|
|
Escherichia coli (25922)
|
Обильный
|
–
|
|
Proteus vulgaris (13315)
|
Обильный
|
+
|
|
Proteus mirabilis (25933)
|
Обильный
|
+
|
|
Providenсia alcalifaciens (12013)
|
Обильный
|
+
|
Примечание:
"+" - положительная реакция, зеленый цвет среды после внесения 10%-ногорастворахлоридажелеза
Ссылки:
1. Ewing W. H., Davis B. R. and Reavis R. W., 1957, Public Health Lab., 15:153.
2. Henrikson, 1950, J. Bact., 60:225.
3. Singer J. and Volcani B. E., 1955, J. Bact., 69:303.
4. MacFaddin J. F., 1985, Media For Isolation-Cultivation-Identification-Maintenance of Medical Bacteria, Vol. I, Williams and Wilkins, Baltimore.
Условия и сроки хранения:
Порошок хранить при температуре ниже +25°С. Использовать до даты, указанной на этикетке. Готовую среду хранить при температуре +2…8°С.