Агар / Бульон Шадлера
 |
HiMedia: инструкция по применению продукции |
|
|
Schaedler Agar Schaedler Broth Продукция зарегистрирована в ФЕДЕРАЛЬНОЙ СЛУЖБЕ ПО НАДЗОРУ В СФЕРЕ ЗДРАВООХРАНЕНИЯ. Набор реагентов: питательные среды основные и компоненты для приготовления питательных сред. Регистрационное удостоверение от 13.12.2012 № ФСЗ 2009/03707 |
Кат. № M291 Кат. № M292 |
|
Бульон предназначен для культивирования широкого круга микроорганизмов, главным образом для выделения строгих анаэробов или факультативно-анаэробных бактерий.
Состав**:
|
Ингредиенты
|
М291
грамм/литр |
М292
грамм/литр |
|
Гидролизат казеина
|
5,67
|
5,67
|
|
Протеозопептон
|
5,00
|
5,00
|
|
Папаиновый перевар соевой муки
|
1,00
|
1,00
|
|
Дрожжевой экстракт
|
5,00
|
5,00
|
|
Глюкоза
|
5,83
|
5,83
|
|
Натрия хлорид
|
1,67
|
1,67
|
|
Калия гидрофосфат
|
0,83
|
0,83
|
|
Трис (гидроксиметиламинометан)
|
3,00
|
3,00
|
|
L-Цистин
|
0,40
|
0,40
|
|
Гемин
|
0,01
|
0,01
|
|
Агар-агар
|
15,00
|
–
|
|
Конечное значение рН (при 25°С) 7,6 ± 0,2
|
|
|
** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам
Приготовление:
Размешать 43,41 г порошка М291 или 28,41 г порошка М292 в 1000 мл дистиллированной воды. При необходимости добавить в бульон 0,02-0,2% агар-агара. Прокипятить с частым помешиванием для полного растворения частиц. Стерилизовать автоклавированием при 1,1 атм (121°С) в течение 15 мин. Остудить и асептично добавить (до 5% об/об) стерильной дефибринированной крови (при необходимости). Перед розливом среду тщательно перемешать. Избегать перегревания среды или ее окисления на свету, так как это приводит к задержке роста бактерий.
Принцип и оценка результата:
Эти среды разработаны Schaedler и соавт. (1), а затем модифицированы Mata и соавт. (2, 3) для подсчета различных аэробных и анаэробных микроорганизмов.
Агар Шадлера с витамином К1 и 5% бараньей крови используется для выделения таких прихотливых анаэробов, как бактероиды. При добавлении 5% бараньей крови, колистина и налидиксовой кислоты этот агар используют для селективного выделения грамположительных анаэробных кокков – пептококков и пептострептококков (4). Введение в ту же среду других антибиотиков – канамицина и ванкомицина – позволяет селективно выделять грамотрицательные анаэробы.
Данные среды являются прекрасной основой, в которую для выделения прихотливых анаэробных бактерий можно добавлять кровь или другие обогатительные добавки. Stalons и соавт. (5) показали, что данный бульон является наиболее эффективным для выращивания облигатно-анаэробных бактерий в атмосфере, содержащей 5% углекислого газа, 10% водорода и 85% азота. Его также можно использовать для определения чувствительности анаэробных микроорганизмов к антибиотикам (5). Известно его использование для определения МИК пробирочным методом (6).
Комбинация гидролизата казеина, протеозопептона, папаинового перевара соевой муки, дрожжевого экстракта и L-цистина обеспечивает присутствие азотистых питательных веществ, витаминов и других факторов необходимых для роста микроорганизмов. Глюкоза является источником энергии. Гемин и витамин К стимулируют рост прихотливых микроорганизмов. Витамин К1 позволяет выращивать Prevotella (Bacteroides) melaninogenicus (7), Bacteroides spp. и стимулирует рост спорообразующих грамположительных бактерий (8). Антикоагулянт полианетолсульфонат натрия (SPS), помешенный в культуральные флаконы, способствует выделению гемокультур (9). Он подавляет фагоцитоз и нейтрализует антимикробную активность компонентов свежей крови (10, 11).
Контроль качества:
Внешний вид порошка:
Гомогенный сыпучий желтый порошок.
Плотность готовой среды:
Образуется среда, соответствующая по плотности 1,5%-ному агаровому гелю (М291).
Цвет и прозрачность готовой среды:
Среда имеет желтую окраску, прозрачна или слегка опалесцирует, когда в пробирках или чашках Петри формируется гель.
Кислотность среды:
При 25°С водные растворы М291 (4,34% вес/об) или М292 (2,84% вес/об) имеют рН 7,6 ± 0,2.
Культуральные свойства:
Ростовые характеристики референс-штаммов через 18-48 ч при 35°С.
|
Штаммы микроорганизмов (АТСС)
|
Рост
|
|
Bacteroides fragilis (25285)
|
Обильный
|
|
Clostridium butyricum (9690)
|
Обильный
|
|
Clostridium perfringens (12924)
|
Обильный
|
|
Clostridium sporogenes (11437)
|
Обильный
|
|
Streptococcus pyogenes (19615)
|
Обильный
|
|
Escherichia coli (25922)
|
Подавляется
|
Ссылки:
1. Schaedler R.W., Dubos R. and Castello R., 1965, J. Exp. Med., 122:59.
2. Mata L.J., Carrillo C. and Villatoro E., 1969, Appl. Microbiol., 17:596.
3. MacFaddin J., 1985, Media for Isolation-Cultivation-Identification-Maintenance of Medical Bacteria, Vol.I, Williams and Wilkins, Baltimore.
4. Estevez, 1984, Lab Med., 15:258.
5. Stalons D.R., Thornsberry C. and Dowel V.R., 1974, Appl. Microbiol., 27:1098.
6. Fass R.J., Prior R.B. and Rotilie C.A., 1975, Antimicro. Agents Chemother., 8:444.
7. Gibbons and MacDonald, 1960, J. Bact., 80:164.
8. Finegold et al, 1974, Manual of Clinical Microbiology, 2nd ed., Lennette and others (Eds.), ASM, Washington, D.C.
9. Rosner, 1968, Am. J. Clin. Pathol., 49:216.
10. Garrod, 1966, J. Pathol. Bacteriol., 91:621.
11. Lowrence and Traub, 1969, Appl. Microbiol., 17:839.
Условия и сроки хранения:
Порошок хранить при температуре ниже +25°С. Использовать до даты, указанной на этикетке. Готовую среду хранить при температуре +2…8°С.