Sellers Differential Agar
Дифференциальный агар по Селлерсу (для неферментирующих) |
M293
|
Этот агар используют для дифференциации и идентификации грамотрицательных неферментирующих бактерий, в частности, Acinetobacter calcoaceticus и Pseudomonas aeruginosa.
Ингредиенты
|
грамм/литр
|
Пептический перевар животной ткани
|
20,00
|
Дрожжевой экстракт
|
1,00
|
L-Аргинин
|
1,00
|
D-Маннит
|
2,00
|
Натрия хлорид
|
2,00
|
Натрия нитрат
|
1,00
|
Натрия нитрит
|
0,35
|
Магния сульфат
|
1,50
|
Калия гидрофосфат
|
1,00
|
Бромтимоловый синий
|
0,04
|
Феноловый красный
|
0,008
|
Агар-агар
|
15,00
|
Конечное значение рН (при 25°С) 6,7 ± 0,2
|
|
** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам
Размешать 45,0 г порошка в 1000 мл дистиллированной воды. Подогреть до кипения для полного растворения частиц. Разлить в пробирки. Стерилизовать автоклавированием при 1,1 атм (121°С) в течение 15 мин. Остудить пробирки в наклонном положении для формирования скоса и столбика. Непосредственно перед посевом на каждый скос наносят по 0,15 мл (или 2 капли) 50%-ного раствора глюкозы.
Агар готовится по прописи, предложенной Sellers (1) для дифференциации и идентификации грамотрицательных неферментирующих бактерий, в частности, Acinetobacter calcoaceticus и Pseudomonas aeruginosa, а также Alcaligenes faecalis. Сложный состав среды позволяет проводить дифференциацию по окислению глюкозы, флюоресценции, образованию азота и сдвигам рН.
Пептический перевар животной ткани и дрожжевой экстракт служат источником азотистых питательных веществ, серы, витаминов группы В, микроэлементов и других веществ, необходимых для роста микроорганизмов. Окисление глюкозы учитывают по появлению желтой полоски на стыке скоса и столбика. Маннит и сульфат магния стимулируют флюоресценцию, а гидрофосфат калия – продукцию азота (1, 2). Нитрат и нитрит натрия служат субстратами для выработки газообразного азота денитрифицирующими бактериями. является источником энергии. Бромтимоловый синий и феноловый красный – индикаторы рН. Положительная реакция на аргининдегидролазу проявляется голубым окрашиванием.
Гомогенный сыпучий желтый порошок.
Образуется среда, соответствующая по плотности 1,5%-ному агаровому гелю.
Среда имеет зеленый цвет, слегка опалесцирует, если в пробирках формируется гель.
При 25°С водный раствор (4,5% вес/об) имеет рН 6,7 ± 0,2.
Ростовые характеристики референс-штаммов через 18-24 ч при 35-37°С.
Штаммы микроорганизмов (АТСС)
|
Рост
|
Скос
|
Столбик
|
Стык
|
ФЛ*
|
Газ (азот)
|
Acinetobacter calcoaceticus (19606)
|
Хороший
|
Голубой
|
Голубой
|
Желтый
|
–
|
–
|
Alcaligenes faecalis (8750)
|
Хороший
|
Голубой
|
Сине-зеленый
|
–
|
–
|
+
|
Pseudomonas aeruginosa (27853)
|
Хороший
|
Сине-зеленый
|
Сине-зеленый
|
Голубой
|
+
|
+
|
Примечание: ФЛ* - желто-зеленая флюоресценция под ультрафиолетом
1. Sellers W., 1964, J. Bact., 87:46.
2. MacFaddin J., 1985, Media for Isolation-Cultivation-Identification-Maintenance of Medical Bacteria, Vol. 1, Williams and Wilkins, Baltimore.
Порошок хранить при температуре ниже +25°С. Использовать до даты, указанной на этикетке. Готовую среду хранить при температуре +2…8°С.