Sorbitol Iron Agar
Железосодержащий агар с сорбитом |
M299
|
Эту среду используют для идентификации и дифференциации энтеропатогенных Escherichia coli, не ферментирующих сорбит.
Ингредиенты
|
грамм/литр
|
Мясной экстракт
|
3,00
|
Протеозопептон
|
15,00
|
D-Сорбит
|
2,00
|
Натрия хлорид
|
5,00
|
Железа аммонийного цитрат
|
0,50
|
Натрия тиосульфат
|
0,50
|
Феноловый красный
|
0,03
|
Агар-агар
|
20,00
|
Конечное значение рН (при 25°С) 7,6 ± 0,2
|
** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам
Размешать 46,0 г порошка в 1000 мл дистиллированной воды. Подогреть до кипения для полного растворения частиц. Разлить в пробирки для тестирования. Стерилизовать автоклавированием при 1,1 атм (121°С) в течение 15 мин. Остудить пробирки в наклонном положении для формирования скоса и столбика.
Эту дифференциальную пробирочную среду готовят в соответствии с прописью Rappaport и Henig (1). Она является модификацией агара Клиглера, где глюкоза и лактоза заменены на сорбит. Патогенные штаммы Escherichia coli идентифицируют по неспособности ферментировать сорбит и продуцировать сероводород.
Бесцветные колонии, выросшие на Агаре с сорбитом (М298) засевают на Железосодержащий агар с сорбитом, заштриховывая скос и прокалывая столбик. Через 18-24 ч инкубирования свежевыделенные патогенные штаммы Escherichia coli серогрупп О111 и О55 не вызывают почернения среды и не продуцируют кислоту. Банальные эшерихии на Железосодержащий агар с сорбитом дают кислоту и газ. Некоторые патогенные эшерихии после лабораторного субкультивирования приобретают способность ферментировать сорбит с образованием кислоты и газа. Такие культуры можно идентифицировать при последующих посевах на Агар Клиглера (М078) или Трехсахарный железосодержащий агар (М021), Бульон с мочевиной (М111). Протеи могут продуцировать кислоту в столбике, с почернением или без него; они дают положительный результат в тесте на уреазу.
Гомогенный сыпучий желтый порошок.
Образуется среда, соответствующая по плотности 2,0%-ному агаровому гелю.
Среда имеет красную окраску, прозрачна или слегка опалесцирует, если в пробирках формируется скошенный гель.
При 25°С водный раствор (4,6% вес/об) имеет рН 7,6 ± 0,2.
Ростовые характеристики референс-штаммов через 18-24 ч при 37°С.
Штаммы микроорганизмов (АТСС)
|
Рост
|
Сорбит
|
Сероводород
|
Escherichia coli (25922)
|
Обильный
|
+*
|
–
|
Enterobacter aerogenes (13048)
|
Обильный
|
+
|
–
|
Proteus vulgaris (13315)
|
Обильный
|
–
|
+
|
Klebsiella pneumoniae (13883)
|
Обильный
|
+
|
–
|
Shigella flexneri (12022)
|
Обильный
|
_
|
–
|
Enterococcus faecalis (29212)
|
Обильный
|
+
|
–
|
Salmonella typhimurium (14028)
|
Обильный
|
+
|
+
|
Примечания:
"+" - положительная реакция, желтый цвет или почернение;
"–" - отрицательная реакция;
"+*" - образование кислоты и газа.
1. Rappaport and Henig, 1952, J. Clin. Path., 5:361.
Порошок хранить при температуре ниже +25°С. Использовать до даты, указанной на этикетке. Готовую среду хранить при температуре +2…8°С.