Tinsdale Agar Base
Основа агара Тинсдаля |
М314
|
Эту среду используют для селективного выделения и дифференциации Corynebacterium diphtheriae.
Ингредиенты
|
грамм/литр
|
Пептический перевар животной ткани
|
20,00
|
Натрия хлорид
|
5,00
|
L-Цистин
|
0,24
|
Натрия тиосульфат
|
0,43
|
Агар-агар
|
15,00
|
Конечное значение рН (при 25°С) 7,4 ± 0,2
|
|
** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам
Размешать 40,7 г порошка в 1000 мл дистиллированной воды. Подогреть до кипения для полного растворения частиц. Стерилизовать автоклавированием при 1,1 атм (121°С) в течение 15 мин. Остудить до 50°С и асептично внести добавку FD073 (части А и В). Тщательно перемешать и разлить в стерильные чашки Петри.
Эта среда первоначально предложена Тинсдалем (1), а затем модифицирована Биллингсом (2) для селективного выделения и дифференциации Corynebacterium diphtheriae.
Пептический перевар животной ткани служит источником азотистых питательных веществ, а L-цистин и тиосульфат натрия образуют индикаторную систему на сероводород. Вносимый в составе добавки теллурит калия подавляет рост всех грамположительных бактерий и большинства микроорганизмов, входящих в состав микрофлоры верхних дыхательных путей.
Corynebacterium diphtheriae, в отличие от большинства дифтероидов верхних дыхательных путей, формируют на данной среде серо-черные колонии, окруженные темно-коричневым ореолом (в результате продукции из цистина сероводорода и его связывания с теллуритом калия). Среда Тинсдаля идеально подходит для рутинного культивирования и выделения Corynebacterium diphtheriae, которые стабильно образуют на ней темно-коричневый ореол (3). Поскольку колонии Corynebacterium ulcerans – дифтероидов верхних дыхательных путей – похожи на колонии Corynebacterium diphtheriae, для их дифференциации нужны дополнительные биохимические тесты (2).
Не рекомендуется инкубировать среду в атмосфере 5-10% углекислого газа, так как это замедляет появление характерного ореола вокруг колоний (4)
Гомогенный сыпучий порошок светло-желтого цвета.
Образуется среда, соответствующая по плотности 1,5%-ному агаровому гелю.
Среда имеет светло-янтарный цвет, слегка опалесцирует, если в чашках Петри формируется гель.
При 25°С водный раствор (4,07% вес/об) имеет рН 7,4 ± 0,2.
Ростовые характеристики референс-штаммов через 40-48 ч при 35°С.
Штаммы микроорганизмов (АТСС)
|
Рост
|
Характер колоний
|
Corynebacterium diphtheriae
|
|
|
var gravis
|
Хороший
или обильный |
Коричневые или черные
с ореолом |
var mitis
|
Хороший
или обильный |
Коричневые или черные
с ореолом |
var intermedius
|
Хороший
или обильный |
Коричневые или черные
с ореолом |
Streptococcus pyogenes (19615)
|
Хороший
|
Точечные черные без ореола
|
Klebsiella pneumoniae (13883)
|
Подавляется
|
–
|
1. Tinsdale G.F., 1955, J. Path. and Bacteriol., 59:461.
2. MacFaddin J., 1985, Media for Isolation-Cultivation-Identification-Maintenance of Medical Bacteria, Vol. I, Williams and Wilkins, Baltimore.
3. Moore M.S. and Parsons E.I.M, 1958, J. Infect. Dis., 102:88.
4. Lennette and others (Eds.), 1985, Manual of Clinical Microbiology, 4th ed. ASM, Washington, D.C.
Порошок хранить при температуре ниже +25°С. Использовать до даты, указанной на этикетке. Готовую среду хранить при температуре +2…8°С не более 72 ч после приготовления.