Malonate Broth Малонатный бульон	M382
Malonate Broth, Ewing Modified Малонатный бульон по Юингу	M779

 

Малонатный бульон рекомендуют для дифференциации эшерихий и энтеробактеров. 

Рост энтеробактерий на малонатном бульоне (M382), слева направо:  1.Salmonella серовара Typhimurium 2.Escherichia coli 3.Klebsiella penumoniae 4.Enterobacter aerogenes 5. Контроль (незасеянная среда)

  

Состав**:

Ингредиенты	М382 грамм/литр	М779 грамм/литр
Дрожжевой экстракт, паста	–	1,00
Глюкоза	–	0,25
Аммония сульфат	2,00	2,00
Калия гидрофосфат	0,60	0,60
Калия дигидрофосфат	0,40	0,40
Натрия хлорид	2,00	2,00
Натрия малонат	3,00	3,00
Бромтимоловый синий	0,025	0,025
Конечное значение рН (при 25°С) 6,7 ± 0,2

** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам

Приготовление:

Размешать 8,0 г порошка М382 или 9,28 г порошка М779 в 1000 мл дистиллированной воды. Разлить в пробирки. Стерилизовать автоклавированием при 1,1 атм (121°С) в течение 15 мин. Избегать внесения в среду дополнительных источников углерода или азота.

Принцип и оценка результата:

Эту среду предложил Лейфсон (1), а в дальнейшем модифицировал Юинг (2), добавив дрожжевой экстракт и глюкозу, для дифференциации колиформных и других кишечных бактерий.

Микроорганизмы, которые одновременно утилизируют малонат натрия в качестве источника углерода и сульфат аммония в качестве источника азота, защелачивают среду ввиду образования гидроокиси натрия (3), что сопровождается изменением цвета индикатора бромтимолового синего с зеленого на синий. Добавление дрожжевого экстракта и небольшого количества глюкозы (как источников витаминов и углерода, соответственно) стимулирует рост тех микроорганизмов, которые не утилизируют малонат или соль аммония. Фосфаты, играя роль буфера, препятствуют щелочению среды. Некоторые малонатотрицательные культуры образуют кислоту из глюкозы и вызывают, соответственно, пожелтение среды.

Контроль качества:

Внешний вид порошка:

Гомогенный сыпучий порошок светло-зеленого цвета.

Цвет и прозрачность готовой среды:

Среда имеет сине-зеленую окраску, прозрачна, без какого-либо преципитата.

Кислотность среды:

При 25°С водные растворы М382 (0,8% вес/об) или М779 (0,928% вес/об) имеют рН 6,7 ± 0,2.

Культуральные свойства:

Ростовые характеристики референс-штаммов через 18-48 ч при 35-37°С.

Штаммы микроорганизмов (АТСС)	Рост на М382	Рост на М779	Малонат (утилизация)
Enterobacter aerogenes (13048)	Обильный	Обильный	+
Klebsiella pneumoniae (13883)	Обильный	Обильный	+
Salmonella arizona (13314)	Обильный	Обильный	+
Salmonella typhimurium (14028)	Средний или хороший	Обильный	–
Escherichia coli (25922)	Средний или слабый	Обильный	–

Ссылки:

1. Leifson, 1933, J. Bact., 25:329.
2. Ewing W., Davis B. and Reavis R., 1957, Public Hlth. Lab., 15:153.
3. MacFaddin J., 1985, Media for Isolation-Cultivation-Identification-Maintenance of Medical Bacteria, Vol. I, Williams and Wilkins, Baltimore

Условия и сроки хранения:

Порошок хранить при температуре ниже +25°С. Использовать до даты, указанной на этикетке. Готовую среду хранить при температуре +2…8°С.