Simmons Agar Base Основа агара Симмонса	M411
Citrate Agar Цитратный агар	M099

 

Эти среды используют для дифференциации энтеробактерий.

Состав**:

Ингредиенты	М411 грамм/литр	М099 грамм/литр
Магния сульфат	0,20	0,20
Аммония дигидрофосфат	0,20	1,00
Натрия аммонийного фосфат	0,80	–
Калия гидрофосфат	–	1,00
Натрия цитрат	–	2,00
Натрия хлорид	5,00	5,00
Бромтимоловый синий	0,08	0,08
Агар-агар	15,00	15,00
Конечное значение рН (при 25°С)	7,0 ± 0,2	6,8 ± 0,2

** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам

Приготовление:

Размешать 21,3 г порошка М411 в 900 мл дистиллированной воды или 24,28 г порошка М099 в 1000 мл дистиллированной воды. Прокипятить для полного растворения частиц. Добавить 100 мл 0,2%-ного раствора цитрата натрия в среду М411. Тщательно перемешать и разлить в пробирки или флаконы. Стерилизовать автоклавированием при 1,1 атм (121°С) в течение 15 мин.

Принцип и оценка результата:

Эти среды используют для дифференциации энтеробактерий по способности использовать цитрат в качестве единственного источника углерода. Первоначально цитратная среда была разработана Козером (1), она содержала соль аммония в качестве единственного источника азота и цитрат в качестве единственного источника углерода, что позволяло дифференцировать Escherichia coli и Enterobacter aerogenes. Затем Симмонс (2) модифицировал среду, введя в ее состав агар-агар и бромтимоловый синий (3). Эта среда рекомендована АРНА (4). Среда содержит гидрофосфат аммония в качестве единственного источника азота и цитрат натрия в качестве единственного источника углерода. Бромтимоловый синий – индикатор рН. Микроорганизмы в ходе размножения на среде продуцируют щелочные продукты, которые способствуют изменению цвета индикатора с зеленого на синий.

Контроль качества:

Внешний вид порошка:

Гомогенный сыпучий желтый порошок.

Плотность готовой среды:

Образуется среда, соответствующая по плотности 1,5%-ному агаровому гелю.

Цвет и прозрачность готовой среды:

Среда имеет травянисто-зеленую окраску, слегка опалесцирует, когда в пробирках формируется скошенный гель.

Кислотность среды:

При 25°С водный раствор М411 (2,13% вес/об) имеет рН 7,0 ± 0,2, а раствор М099 (2,43% вес/об) имеет рН 6,8 ± 0,2.

Культуральные свойства:

Ростовые характеристики референс-штаммов через 18-24 ч при 35-37°С.

Штаммы микроорганизмов (АТСС)	Рост	Цвет среды	Цитрат (утилизация)
Enterobacter aerogenes (13048)	Хороший или обильный	Синий	+
Salmonella enteritidis (13076)	Хороший или обильный	Синий	+
Salmonella typhimurium (14028)	Хороший или обильный	Синий	+
Salmonella typhi (6539)	Средний или хороший	Зеленый	–
Escherichia coli (25922)	Отсутствует	Зеленый	–
Shigella dysenteriae (13313)	Отсутствует	Зеленый	–

Ссылки:

1. Koser, 1923, J. Bact., 8:493.
2. Simmons, 1926, J. Infect. Dis., 39:209.
3. MacFaddin J., 1985, Media for Isolation-Cultivation-Identification-Maintenance of Medical Bacteria, Vol. 1, Williams and Wilkins, Baltimore.
4. American Public Health Association, 1981, Standard Methods for the Examination of Water and Wastewater, 15th ed., APHA Inc., Washington,D.C.

Условия и сроки хранения:

Порошок хранить при температуре ниже +25°С. Использовать до даты, указанной на этикетке. Готовую среду хранить при температуре +2…8°С.