Thayer Martin Medium Base
Основа среды для патогенных нейссерий |
M413
|
Этот агар с добавками используют в качестве селективной среды для выделения гонококков из патологического материала.
Ингредиенты
|
грамм/литр
|
Пептон специальный
|
23,00
|
Крахмал
|
1,00
|
Натрия хлорид
|
5,00
|
Агар-агар
|
13,00
|
Конечное значение рН (при 25°С) 7,0 ± 0,2
|
** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам
Размешать 21,0 г порошка в 450 мл дистиллированной воды. Прокипятить для полного растворения частиц. Стерилизовать автоклавированием при 1,1 атм (121°С) в течение 15 мин. Остудить среду до 45°С и асептично добавить 50 мл стерильной лизированной крови, растворенное в воде содержимое 1 пузырька с ростовой добавкой (FD025) и добавку V.N.C. (FD023) или добавку V.C.N.T. (FD024). Тщательно перемешать и разлить в стерильные чашки Петри.
Если будет использован гемоглобин (FD022), размешать 21,0 г порошка среды в 250 мл дистиллированной воды. Прокипятить для полного растворения частиц. Приготовить 250 мл 2%-ного раствора гемоглобина. Стерилизовать обе части отдельно автоклавированием при 1,1 атм (121°С) в течение 15 мин. Остудить до 45°С, смешать части и асептично добавить селективные добавки, как описано выше.
Вначале Carpenter и Morton предложили среду для выделения гонококков в течение 24 ч (1). Позже было показано преимущество среды с добавлением гемоглобина и дрожжевого концентрата для выделения гонококков (2). Соответственно данная среда была разработана (3, 4) для первичного выделения Neisseria meningitidis и Neisseria gonorrhoeae из материала, содержащего смешанную микрофлору (из глотки, влагалища, прямой кишки, уретры). Для придания селективных свойств в среду добавляют ванкомицин, колистин и нистатин (4), и дополнительно триметоприм (5).
Специальный пептон обеспечивает среду питательными веществами, крахмал нейтрализует токсические жирные кислоты, если они присутствуют в агаре. Гемоглобин является источником фактора Х, а фактор V (НАД) вносят с ростовой добавкой, которая содержит также витамины, аминокислоты, коферменты и другие вещества, стимулирующие рост нейссерий. Ванкомицин и колистин подавляют рост грамположительных и грамотрицательных бактерий, соответственно (6). Нистатин подавляет рост грибов. На этой среде может подавляться рост гемофильных палочек. При посеве материала из ротоглотки на ней могут вырасти некоторые штаммы Capnocytophaga.
Гомогенный сыпучий желтый порошок.
Образуется среда, соответствующая по плотности 1,3%-ному агаровому гелю.
Основа среды имеет желтую окраску, прозрачна или слегка опалесцирует. После добавления гемоглобина и специальных добавок среда приобретает шоколадный цвет, непрозрачна, если в чашках Петри формируется гель.
При 25°С водный раствор (4,2% вес/об) имеет рН 7,0 ± 0,2.
Ростовые характеристики референс-штаммов через 18-48 ч при 35°С.
Штаммы микроорганизмов (АТСС)
|
Рост
|
Neisseria meningitidis (13090)
|
Хороший или обильный
|
Neisseria gonorrhoeae (19424)
|
Хороший или обильный
|
Escherichia coli (25922)
|
Подавляется
|
Proteus mirabilis (25933)
|
Подавляется
|
1. Carpenter and Morton, 1947, Proc. N.Y. State Assoc. Public Hlth. Labs., 27:58.
2. Carpenter et al, 1949, Am. J. Syphil. Gonorrh. Vener. Dis., 33:164.
3. Martin, Billings, Hackney and Thayer, 1967, Public Hlth. Rep., 82:361.
4. Thayer J. and Martin J.E. Jr., 1966, Public Health Rep., 81:559.
5. Martin J.E. Jr. and Lester A., 1971, HSMHA Hlth. Service Rep., 86(1):30.
6. MacFaddin J., 1985, Media for Isolation-Cultivation-Identification-Maintenance of Medical Bacteria, Vol. I, Williams and Wilkins, Baltimore.
Порошок хранить при температуре ниже +25°С. Использовать до даты, указанной на этикетке. Готовую среду хранить при температуре +2…8°С.