Spirit Blue Agar
Агар со спиртовым синим |
M445
|
Эту среду используют для определения и подсчета липолитических микроорганизмов.
Ингредиенты
|
грамм/литр
|
Гидролизат казеина
|
10,00
|
Дрожжевой экстракт
|
5,00
|
Спиртовой синий
|
0,15
|
Агар-агар
|
17,00
|
Конечное значение рН (при 25°С) 6,8 ± 0,2
|
|
** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам
Размешать 32,15 г порошка в 1000 мл дистиллированной воды. Подогреть до кипения для полного растворения частиц. Стерилизовать автоклавированием при 1,1 атм (121°С) в течение 15 мин. Остудить до 50°С и асептично медленно добавить 30 мл субстрата для липазы (при помешивании, чтобы равномерно его распределить в среде).
Эту среду готовят в соответствии с прописью Starr (1). Она является основой, в которую добавляют липоидный субстрат для определения и подсчета липолитических микроорганизмов. Раньше для этого на практике в качестве индикаторов липолиза применяли красители, но иногда они подавляют рост микроорганизмов. Как показал Starr, спиртовой синий инертен и в этом смысле является идеальным индикатором липолиза.
В качестве субстратов для выявления липазной активности рекомендуют применять муку из хлопковых семян, оливковое масло и др. Подходящую эмульсию можно приготовить, растворив 10,0 г масла акации или 1,0 г твина-80 в 400 мл теплой дистиллированной воды и добавив при тщательно перемешивании 100 мл хлопкового или оливкового масла.
Гомогенный сыпучий серовато-желтый порошок.
Образуется среда, соответствующая по плотности 1,7%-ному агаровому гелю.
Основа среды имеет голубую окраску, прозрачна или слегка опалесцирует. При добавлении липазного субстрата среда приобретает цвет лаванды и опалесцирует, если в чашках Петри формируется гель.
При 25°С водный раствор (3,22% вес/об) имеет рН 6,8 ± 0,2.
Ростовые характеристики референс-штаммов через 48-72 ч при 35-37°С.
Штаммы микроорганизмов (АТСС)
|
Рост
|
Липаза
|
Proteus mirabilis (25933)
|
Обильный
|
–
|
Staphylococcus aureus (25923)
|
Обильный
|
+
|
Staphylococcus epidermidis (12228)
|
Обильный
|
+
|
1. Starr, 1941, Science, 93:333.
Порошок хранить при температуре ниже +25°С. Использовать до даты, указанной на этикетке. Готовую среду хранить при температуре +2…8°С.