Leptospira Medium Base, Korthof Modified
Основа модифицированной среды Картофа для лептоспир |
M457
|
Эту среду используют для культивирования и хранения лептоспир.
Ингредиенты
|
грамм/литр
|
Пептический перевар животной ткани
|
0,80
|
Натрия хлорид
|
1,40
|
Натрия гидрокарбонат
|
0,02
|
Калия хлорид
|
0,04
|
Кальция хлорид
|
0,04
|
Калия дигидрофосфат
|
0,24
|
Натрия гидрофосфат
|
0,88
|
Конечное значение рН (при 25°С) 7,2 ± 0,2
|
|
** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам
1) Основа среды:
Размешать 3,42 г порошка в 1000 мл дистиллированной воды. Подогреть для полного растворения частиц. Разлить по 100 мл во флаконы. Стерилизовать автоклавированием при 0,7 атм (115°С) в течение 15 мин. Остудить до 55°С.
2) Раствор гемоглобина:
К сгустку крови (после удаления сыворотки) добавить такой же объем дистиллированной воды. Провести несколько циклов замораживания-оттаивания для разрушения частиц. Стерилизовать фильтрованием (через мембранный или фильтр Зейтца).
3) Полная среда:
На каждые 100 мл стерильной основы добавить по 8 мл инактивированной сыворотки крови и 0,8 мл стерильного раствора гемоглобина. Тщательно перемешать. Разлить по 2-3 мл в стерильные пробирки или флаконы с завинчивающимися крышками. Проверить на стерильность инкубированием при 37°С.
Эта среда описана Korthof (1) для культивирования и хранения лептоспир.
Пептический перевар животной ткани и соли, удовлетворяя питательные потребности, способствуют росту лептоспир. Фосфаты обеспечивают буферные свойства среды, а хлорид натрия – оптимальное осмотическое давление.
Гомогенный сыпучий желтый порошок.
Среда имеет желтовато-коричневую окраску, прозрачна или слегка опалесцирует после добавления сыворотки крови и гемоглобина.
При 25°С водный раствор (0,342% вес/об) имеет рН 7,2 ± 0,2.
Ростовые характеристики референс-штаммов в течение 2-7 суток при 30°С.
Штаммымикроорганизмов
|
Рост
|
Leptospira interrogans serogroup canicola
|
Обильный
|
Leptospira interrogans serogroup grippotyphosa
|
Обильный
|
Leptospira interrogans serogroup australis
|
Обильный
|
1. Korthof G., 1932, Zentralbl. Bakteriol. Parasitenkd. Infektionskr. Hyg. Abt. I. Orig., 125:429.
2. Rechcigl M. Jr. (Ed.), 1978, Handbook Series in Nutrition and Food, Vol. III, CRC Press.
Порошок хранить при температуре ниже +25°С. Использовать до даты, указанной на этикетке. Готовую среду хранить при температуре +2…8°С.