B.Y.E. Agar
Агар B.Y.E. |
M470
|
Broth Base Бульонная основа B.Y.E. для культивирования микоплазм и L-форм бактерий |
M471 |
Данные среды являются упрощенной средой для культивирования микоплазм и близких к ним микроорганизмов, а также L-форм бактерий.
Ингредиенты
|
M470
грамм/литр |
M471
грамм/литр |
Настой мозга и сердца (М210)
|
37,00
|
37,00
|
Дрожжевой экстракт
|
2,00
|
2,00
|
Агар-агар
|
13,00
|
–
|
Конечное значение рН (при 25°С) 7,9 ± 0,2
|
|
|
** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам
Размешать 52,0 г порошка М470 или 39,0 г порошка М471 в 850 мл дистиллированной воды.
Прокипятить для полного растворения частиц. Стерилизовать автоклавированием при 1,1 атм (121°С) в течение 15 мин. Остудить до 50°С, асептично добавить 150 мл стерильной крови (или сыворотки) человека или животного. Осторожно перемешать и разлить в чашки Петри.
Среды B.Y.E., разработанные Barile, Yaguchi и Eveland, являются упрощенной средой для рутинных исследований по эколого-эпидемиологическим особенностям и участию в патогенезе соответствующих заболеваний микоплазм и близких к ним микроорганизмов (PPLO), а также L-форм бактерий (1). Посевы делают в двух повторностях: один инкубируют в аэробных, второй – в анаэробных условиях, в течение 48 ч или более. Обычно рост появляется на 3-5 сутки, однако, отрицательный результат выдают не ранее 10 суток. Культивирование в анаэробных условиях наиболее важно в первые 3 дня, дальнейшее инкубирование можно проводить в аэробных условиях. На этих средах можно выделять PPLO (при уретритах, изъязвлениях полового члена, из отделяемого шеечного канала), а также L-формы коринебактерий, нейссерий, стрептококков. Их используют для выявления микоплазменной (PPLO) контаминации культур тканей (2), для работы с мембранными фильтрами (3). В бульоне B.Y.E. PPLO растут, образуя нежный осадок на дне пробирки.
Гомогенный сыпучий светло-желтый порошок.
Образуется среда, соответствующая по плотности 1,3%-ному агаровому гелю (М470).
Готовая среда имеет желтую окраску, прозрачна или слегка опалесцирует, если в пробирках или чашках Петри формируется гель.
При 25°С водный раствор М470 (5,2% вес/об) или М471 (3,9% вес/об) имеют рН 7,9 ± 0,2.
Ростовые характеристики референс-штаммов через 5-10 дней при 35°С в анаэробных условиях с увлажнением атмосферы.
Штаммы микроорганизмов (АТСС)
|
Рост
|
Mycoplasma bovis (25523)
|
Хороший
или обильный |
Mycoplasma gallinarum (19708)
|
Хороший
или обильный |
Mycoplasma pneumoniae (15531)
|
Хороший
или обильный |
Streptococcus pneumoniae (6303)
|
Хороший
или обильный |
1. Barile, Yaguchi, Eveland, 1958, Am. J. Clin, Path., 30:171.
2. Barile, 1962, National Cancer Institute Monograph, No.7:5.
3. Barile, 1962, J. Bact, 83:430.
Порошок хранить при температуре ниже +25°С. Использовать до даты, указанной на этикетке. Готовую среду хранить при температуре +2…8°С в вертикальном положении и использовать как можно быстрее.