|
Diagnostic Sensitivity Test Agar (D.S.T. Agar)
Агар для определения чувствительности к химиопрепаратам (DST-агар) |
М502
|
Эту селективную среду используют для определения чувствительности микроорганизмов к антибиотикам.
|
Ингредиенты
|
грамм/литр
|
|
Протеозопептон
|
10,00
|
|
Настой телятины, порошок
|
10,00
|
|
Глюкоза
|
2,00
|
|
Натрия хлорид
|
3,00
|
|
Натрия гидрофосфат
|
2,00
|
|
Натрия ацетат
|
1,00
|
|
Аденина сульфат
|
0,01
|
|
Гуанина гидрохлорид
|
0,01
|
|
Урацил
|
0,01
|
|
Ксантин
|
0,01
|
|
Тиамин
|
0,00002
|
|
Агар-агар
|
15,00
|
|
Конечное значение рН (при 25°С) 7,4 ± 0,2
|
|
** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам
Размешать 43,0 г порошка в 1000 мл дистиллированной воды. Прокипятить для полного растворения частиц. Стерилизовать автоклавированием при 1,1 атм (121°С) в течение 15 мин. Для приготовления кровяного агара остудить основу до 50°С и асептично внести до 7% (об/об) стерильную дефибринированную кровь лошади. Тщательно перемешать осторожным вращением и разлить среду в стерильные чашки Петри.
Этот агар рекомендуют для диагностических целей, а также для определения чувствительности микроорганизмов к антибиотикам и химиотерапевтическим препаратам, например, к сульфаниламидам. Последние образуют четкие зоны задержки роста благодаря отсутствию в среде аналогов, конкурирующих с этими веществами.
Среда обладает питательной ценностью, так как в ней имеются аминокислоты, азотистые основания и глюкоза. Входящие в среду соли препятствуют резким сдвигам рН, что может повлиять на результаты тестов чувствительности и гемолитические реакции (1), особенно на уровень МИК чувствительных к сдвигам рН антибиотиков (2). Тиамин восполняет потребность микроорганизмов в витамине. Дополнительные основания (аденин, гуанин, урацил и ксантин) улучшают условия проведения теста на антибиотикочувствительность. Неприхотливые микроорганизмы (микрококки, сальмонеллы, шигеллы, колиформные бактерии и протеи) можно засевать на эту среду без добавления крови. Прихотливые (гемофильные палочки, менингококки, альфа- и бета-гемолитические стрептококки) нуждаются в добавлении крови. Чувствительность к антибиотикам определяют следующим образом: суспензию испытуемого микроорганизма распределяют по поверхности среды, после чего на нее равномерно укладывают диски с антибиотиками (3) и инкубируют 18 ч при 37°С. Записывают величину образовавшихся зон задержки роста.
Гомогенный сыпучий желтый порошок.
Образуется среда, соответствующая по плотности 1,5%-ному агаровому гелю.
Готовая среда имеет янтарную окраску, прозрачна или слегка опалесцирует, если в чашках Петри формируется гель. Если добавлена кровь, среда становится вишнево-красного цвета.
При 25°С водный раствор (4,3% вес/об) имеет рН 7,4 ± 0,2.
Ростовые характеристики референс-штаммов через 18-24 ч при 35-37°С.
|
Штаммы микроорганизмов (АТСС)
|
Рост
(без антибиотиков) |
|
Escherichia coli (25922)
|
Обильный
|
|
Micrococcus luteus (10240)
|
Обильный
|
|
Neisseria meningitidis (13090)
|
Обильный
(с добавлением крови) |
|
Proteus mirabilis (25933)
|
Обильный
|
|
Salmonella typhi (6539)
|
Обильный
|
|
Shigella flexneri (12022)
|
Обильный
|
|
Salmonella enteritidis (13076)
|
Обильный
|
|
Staphylococcus aureus (25923)
|
Обильный
|
|
Enterococcus faecalis (29212)
|
Обильный
|
|
Streptococcus pyogenes (19615)
|
Обильный
(с добавлением крови) |
|
Streptococcus pneumoniae (6303)
|
Обильный
|
1. Expert Committee on Antibiotics, 1961, World Health Organization Technical Report Series No. 210, WHO, Geneva.
2. Bechtle R.M. and Schere G.H., 1958, Antibiotics and Chemotherapy, 8(12):599.
3. Marshall J.H. and Kelsey J.C., 1960, J. Hyg. Camb., 58:367.
Порошок хранить при температуре ниже +25°С. Использовать до даты, указанной на этикетке. Готовую среду хранить при температуре +2…8°С.