Дифференциальный бульон для клостридий
|
Differential Reinforced Clostridial Broth
Дифференциальный бульон для клостридий |
М549 / М549I
|
Среду используют для культивирования видов Clostridium из воды.
 |
Определение клостридий методом наиболее вероятных чисел
|
Состав**:
|
Ингредиенты
|
М549
грамм/литр |
М549I
грамм/литр |
|
Пептический перевар животной ткани
|
10,00
|
–
|
|
Триптоза
|
–
|
10,00
|
|
Говяжий экстракт
|
10,00
|
–
|
|
Мясной экстракт
|
–
|
10,00
|
|
Дрожжевой экстракт
|
1,50
|
1,50
|
|
Крахмал
|
1,00
|
1,00
|
|
Натрия ацетат гидрированный
|
5,00
|
5,00
|
|
Глюкоза
|
1,00
|
1,00
|
|
L-цистеина гидрохлорид
|
0,50
|
0,50
|
|
Конечное значение рН (при 25°С)
|
7,2 ± 0,2
|
7,2 ± 0,2
|
** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам
Приготовление:
Размешать 29,0 г порошка в 1000 мл дистиллированной воды. Подогреть до кипения для полного растворения частиц. Стерилизовать автоклавированием при 1,1 атм (121°С) в течение 15 мин. Непосредственно перед использованием в среду асептично добавляют стерилизованную фильтрованием смесь, которую готовят следующим образом. Для приготовления среды с обычной концентрацией, на каждые 25 мл среды добавляют 0,5 мл смеси, состоящей из равных объемов 4%-ного (вес/об) раствора натрия сульфита и 7%-ного (вес/об) раствора цитрата железа, среды двойной концентрации – на 50 мл вносят 2,0 мл смеси, на 10 мл – 0,4 мл, соответственно. Тщательно перемешивают.
Принцип и оценка результата:
Эта среда основана на прописи Barnes и Ingram (1), а также Gibbs и Freame (2) для культивирования и подсчета сульфитредуцирующих клостридий в пищевых продуктах и воде пробирочным методом. С небольшими модификациями (замена пептона на триптозу) эту среду рекомендует комитет ISO (3). Дифференциация происходит на основе способности редуцировать сульфит до сульфида, который с ионами железа образует черный преципитат. Триптоза или пептический перевар животной ткани, мясной экстракт, дрожжевой экстракт, крахмал, натрия ацетат обеспечивают присутствие в среде важнейших нутриентов для метаболизма микробов. Глюкоза является ферментируемым субстратом. L-цистеина гидрохлорид действует, как редуцирующий агент.
Контроль качества:
Внешний вид порошка:
Гомогенный сыпучий желтый порошок.
Цвет и прозрачность готовой среды:
Среда имеет светло-желтую окраску, прозрачна, без какого-либо преципитата.
Кислотность среды:
При 25°С водный раствор (2,9% вес/об) имеет рН 7,2 ± 0,2.
Культуральные свойства:
Ростовые характеристики референс-штаммов в течение 1 недели при 30°С.
|
Штаммы микроорганизмов (АТСС)
|
Рост
|
Почернение среды*
|
|
Clostridium perfringens (13124)
|
Хороший
или обильный |
+
|
|
Clostridium sporogenes (11437)
|
Хороший
или обильный |
+
|
Примечание: * образование сульфида железа
Ссылки:
1. Barnes E.M. and Ingram M., 1956, J. Appl. Bacteriol., 19(1):117.
2. Gibbs B.M. and Freame B., 1965, J. Appl. Bacteriol., 28(1):95.
3. International Organization for Standardization (ISO), 1986, Draft ISO/DIS : 6461-1.
Условия и сроки хранения:
Порошок хранить при температуре ниже +25°С. Использовать до даты, указанной на этикетке. Готовую среду хранить при температуре +2…8°С.