Columbia C.N.A. Agar
Колумбийский агар для грамположительных кокков (C.N.A.) |
М560
|
Columbia C.N.A. Agar (with 1% Agar) Колумбийский агар для грамположительных кокков (C.N.A.) с 1% агар-агара |
M560A |
Эта среда используется для селективного выделения «патогенных» грамположительных кокков из клинического и другого материала.
Ингредиенты
|
М560
грамм/литр |
М560А
грамм/литр |
Биопептон
|
20,00
|
20,00
|
Триптический перевар говяжьего сердца
|
3,00
|
3,00
|
Крахмал кукурузный
|
1,00
|
1,00
|
Натрия хлорид
|
5,00
|
5,00
|
Колистина сульфат
|
0,01
|
0,01
|
Налидиксовая кислота
|
0,015
|
0,015
|
Агар-агар
|
15,00
|
10,00
|
Конечное значение рН (при 25°С) 7,3 ± 0,2
|
|
|
** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам
Размешать 44,0 г порошка М560 или 39,0 г порошка М560А в 1000 мл дистиллированной воды. Прокипятить для полного растворения частиц. Стерилизовать автоклавированием при 1,1 атм (121°С) в течение 15 мин. Остудить до 50°С и асептично внести стерильную дефибринированную кровь барана (до 5% об/об). Тщательно перемешать и разлить среду в стерильные чашки Петри.
Эту среду готовят по модифицированной прописи колумбийского агара, который разработали Ellner и соавт.(1). Комбинация пептонов обеспечивает быстрый и обильный рост на ней даже прихотливых микроорганизмов. Кроме того, на ней вырастают типичные колонии, лучше проявляется пигментообразование и более четкие гемолитические реакции. Ellner и соавторы нашли, что на этой среде с 5% бараньей крови, 10 мкг/мл колистина и 15 мкг/мл налидиксовой кислоты подавляется рост протеев, клебсиелл и псевдомонад, но не стафилококков, гемолитических стрептококков или энтерококков. Колистин и налидиксовая кислота подавляют рост грамотрицательных бактерий, повреждая их мембрану и нарушая репликацию ДНК, соответственно (2).
Гомогенный сыпучий светло-желтый порошок.
Образуется среда, соответствующая по плотности 1,5%-ному (М560) или 1%-ному (М560А) агаровому гелю.
Основа среды имеет желтую окраску, слегка опалесцирует при затвердевании. После добавления к основе стерильной дефибринированной крови (до 5% об/об) среда имеет вишнево-красный цвет и опалесцирует, если в чашках Петри формируется гель.
При 25°С водные растворы М560 (4,4% вес/об) или М560А (3,9% вес/об) имеют рН 7,3 ± 0,2.
Ростовые характеристики референс-штаммов через 40-48 ч при 35-37°С.
Штамм микроорганизмов (АТСС)
|
Рост
|
Гемолиз
|
Staphylococcus aureus (25923)
|
Обильный
|
Бета или гамма
|
Staphylococcus epidermidis (12228)
|
Обильный
|
Гамма
|
Streptococcus pneumoniae (6303)
|
Обильный
|
Альфа
|
Streptococcus pyogenes (19615)
|
Обильный
|
Бета
|
Escherichia coli (25922)
|
Подавляется
|
–
|
Neisseria meningitidis (13090)
|
Подавляется
|
–
|
1. Ellner et al, 1966, Am. J. Clin. Path., 45:502.
2. Estevez, 1984, Lab. Med., 15:258.
Порошок хранить при температуре ниже +25°С. Использовать до даты, указанной на этикетке. Готовую среду хранить при температуре +2…8°С.