RS Medium Base
Основа селективной среды для Aeromonashydrophila |
M576
|
Этот агар с селективной добавкой (новобиоцином) используют для селективного выделения, культивирования и предварительной идентификации Aeromonashydrophila.
Ингредиенты
|
грамм/литр
|
Дрожжевой экстракт
|
3,00
|
Мальтоза
|
3,50
|
L-Цистеина гидрохлорид
|
0,30
|
L-Лизина гидрохлорид
|
5,00
|
L-Орнитина гидрохлорид
|
6,50
|
Натрия тиосульфат
|
6,80
|
Железа аммонийного цитрат
|
0,80
|
Натрия дезоксихолат
|
1,00
|
Натрия хлорид
|
5,00
|
Бромтимоловый синий
|
0,03
|
Агар-агар
|
13,50
|
Конечное значение рН (при 25°С) 7,0 ± 0,2
|
|
** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам
Размешать 45,43 г порошка в 990 мл дистиллированной воды. Подогреть до кипения для полного растворения частиц. НЕ АВТОКЛАВИРОВАТЬ СРЕДУ. Остудить до 45-50°С и асептично добавить растворенное в воде содержимое 1 флакончика с добавкой FD096. Тщательно перемешать и разлить среду в стерильные чашки Петри.
Агар разработан Rimler и Shotts (1) и основан на прописях ксилозо-лизиновых агаров (2, 3). Его используют для селективного выделения и предварительной идентификации Aeromonashydrophila и других грамотрицательных бактерий по таким свойствам, как декарбоксилирование лизина и орнитина, ферментации мальтозы и образование сероводорода (4). Дрожжевой экстракт является источником питательных веществ. Натрия тиосульфат, L-цистеина гидрохлорид и железа аммонийного цитрат являются индикатором продукции сероводорода. Ферментацию мальтозы определяют по цвету индикатора бромтимолового синего. Дезоксихолат натрия и новобиоцин подавляют рост грамположительных бактерий и вибрионов.
Хотя представители вида Citrobacterfreundiiобычно образуют сероводород, иногда встречаются сероводородотрицательные штаммы. Результаты учитывают через 24 ч, так как через 26 ч начинается постепенное восстановление цвета после ферментации мальтозы (с желтого на первоначальный зеленый). Среду следует инкубировать именно при 35°С, так как при других температурах Aeromonassalmonicidaможет давать ложноположительную реакцию. Для исключения принадлежности культур к цитробактерам желтые колонии (сероводородположительные с черным центром или без него) следует проверить на наличие оксидазы. В течение 24 ч на этой среде подавляется рост Proteusmirabilis.
Гомогенный сыпучий светло-зеленый порошок.
Образуется среда, соответствующая по плотности 1,35%-ному агаровому гелю.
Среда имеет темно-зеленую окраску, прозрачна, если в чашках Петри формируется гель.
При 25°С водный раствор (4,54% вес/об) имеет рН 7,0 ± 0,2.
Ростовые характеристики референс-штаммов через 24 ч при 35°С.
Штаммы микроорганизмов (АТСС)
|
Мальтоза
|
Лизин/Орнитин (декарбоксилирование)
|
Сероводород
|
Aeromonas hydrophila (7966)
|
+
|
–
|
–
|
Citrobacter freundii (8090)
|
–
|
V
|
+
|
Salmonella typhi (6539)
|
+
|
–
|
–
|
Proteus vulgaris (13315)
|
+
|
–
|
+
|
Escherichia coli (25922)
|
–
|
V
|
–
|
Примечания:
" Ферментация мальтозы +" - желтый цвет колоний;
"Декарбоксилирование лизина и/или орнитина" - зеленовато-желтый или желтый оттенок;
"Образование сероводорода" - черный центр колонии;
"V" - вариабельный результат.
1. Shotts E. B. Jr. and Rimler R., 1973, Appl. Microbiol., 26(4):550.
2. Taylor W.I., 1965, Am. J. Clin. Pathol., 44:471.
3. Taylor W.I. and Harris B., 1965, Am. J. Clin. Pathol., 44:476.
4. MacFaddin J.F., 1985, Media for Isolation - Cultivation - Identification - Maintenance of Medical Bacteria, Vol. I, Williams and Wilkins, Baltimore.
Порошок хранить при температуре ниже +25°С. Использовать до даты, указанной на этикетке. Готовую среду хранить при температуре +2…8°С.