Агар с Тергитолом 7
|
Modified Tergitol 7 Agar
Агар с Тергитолом 7, модифицированный |
M616I |
Эту среду используют для селективного выделения и подсчета колиформных бактерий в воде мембранным методом. Она рекомендована также международным комитетом (ISO 9308:1:1990).
 |
Рост на гептадецилсульфатном агаре (M616):
|
Состав**:
|
Ингредиенты
|
грамм/литр
|
|
Пептический перевар животной ткани
|
10,00
|
|
Дрожжевой экстракт
|
6,00
|
|
Мясной экстракт
|
5,00
|
|
Лактоза
|
20,00
|
|
Тергитол
|
0,10
|
|
Бромтимоловый синий
|
0,05
|
|
Агар-агар
|
16,00
|
|
Конечное значение рН (при 25°С) 7,2 ± 0,2
|
|
** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам
Приготовление:
Размешать 57,15 г порошка в 1000 мл дистиллированной воды. Прокипятить для полного растворения частиц. Стерилизовать автоклавированием при 1,1 атм (121°С) в течение 15 мин. Остудить до 45-50°С и асептично добавить 2,5 мл 1%-ного раствора трифенилтетразолия хлорида (ТТХ)(FD057). Тщательно перемешать и разлить в стерильные чашки Петри.
Принцип и оценка результата:
Эта среда является селективной и дифференцирующей для подсчета колиформных бактерий в воде. Чепмен (1, 2) изменил первоначальную пропись агара, внеся в его состав ТТХ. Теперь он рекомендован международным комитетом (3).
Тергитол 7 является селективным агентом (4), который подавляет рост грамположительных микроорганизмов и предотвращает роение протеев, способствуя выделению колиформных бактерий. О ферментации лактозы судят по изменению цвета индикатора рН бромтимолового синего. ТТХ позволяет раньше обнаружить и идентифицировать Escherichia coli и Enterobacter aerogenes в воде и пищевых продуктах (5). Колиформные бактерии (кроме Escherichia coli и Enterobacter aerogenes) быстро восстанавливают ТТХ до нерастворимого в воде формазана, который окрашивает их колонии в красный цвет. Колонии ферментирующих лактозу микроорганизмов зеленовато-желтые, а не ферментирующих – красные, окруженные синими зонами.
Контроль качества:
Внешний вид порошка:
Гомогенный сыпучий порошок желтого цвета.
Плотность готовой среды:
Образуется среда, соответствующая по плотности 1,6%-ному агаровому гелю.
Цвет и прозрачность готовой среды:
Среда имеет зеленую окраску, прозрачна или слегка опалесцирует, если в чашках Петри формируется гель.
Кислотность среды:
При 25°С водный раствор (5,715 вес/об) имеет рН 7,2 ± 0,2.
Культуральные свойства:
Ростовые характеристики референс-штаммов через 18-24 ч при 35°С.
|
Штаммы микроорганизмов (АТСС)
|
Рост
|
Цвет колоний*
|
Цвет колоний**
|
|
Escherichia coli (25922)
|
Обильный
|
Желтый
|
Желтый с желтой зоной
|
|
Enterobacter aerogenes (13048)
|
Обильный
|
Желтый
|
Зеленовато-желтые
|
|
Klebsiella pneumoniae (13883)
|
Обильный
|
Желтый
|
Зеленовато-желтые
|
|
Salmonella typhimurium (14028)
|
Обильный
|
Бесцветные
|
Красные с синей зоной
|
|
Pseudomonas aeruginosa (27853)
|
Хороший
|
Бесцветные
|
Красные с синей зоной
|
|
Proteus vulgaris
|
Хороший
|
Бесцветные
|
Красные с синей зоной
|
|
Staphylococcus aureus (25923)
|
Подавляется
|
–
|
–
|
Примечания:
* - на основной среде
** - на среде с ТТХ
Ссылки:
1. Chapman G.H., 1947, J. Bact., 53:504.
2. Chapman G.H., 1951, Am. J. Public Health, 41:1381.
3. International Organization For Standardization (ISO), 1990, Draft ISO/DIS 9308-1.
4. Pollard A.L., 1946, Science., 103:758.
5. Mossel D.A.A., 1962, J. Appl. Bact., 25:20.
Условия и сроки хранения:
Порошок хранить при температуре ниже +25°С. Использовать до даты, указанной на этикетке. Готовую среду хранить при температуре +2…8°С.