Mycoplasma Synoviae Medium Base Основа среды для Mycoplasma synoviae

M624

 

Эту среду с добавками используют для культивирования штаммов микоплазм от птиц.

Состав**:

Ингредиенты	грамм/литр
Настой мозга теленка	200,00
Настой говяжьего сердца	250,00
Протеозопептон	10,00
Натрия хлорид	5,00
Натрия гидрофосфат	2,50
Глюкоза	2,00
Дрожжевой аутолизат	5,00
Трис (буфер)	0,25
2,3,5-Трифенилтетразолия хлорид (ТТХ)	0,05
Конечное значение рН (при 25°С) 8,0 ± 0,2

** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам

Приготовление:

Размешать 42,3 г порошка в 900 мл дистиллированной воды. Тщательно перемешать для полного растворения частиц. Стерилизовать фильтрованием и асептично добавить 100 мл стерильной лошадиной сыворотки (RM1239), 1 000 000 ЕД пенициллина и 0,25 г ацетата таллия. Тщательно перемешать и разлить в соответствующую стерильную посуду.

Принцип и оценка результата:

Основная информация о микоплазмах и их культивировании отражена в ранних публикациях (1, 2). Данная среда содержит дрожжевой аутолизат – богатый источник никотинамидадениндинуклеотида (НАД), в котором имеется потребность у микоплазм. Настой мозга теленка и говяжьего сердца, наряду с протеозопептоном, являются источником органического азота, углерода, серы, витамином и микроэлементов. Хлорид натрия обеспечивает оптимальное осмотическое давление и снабжает важными ионами среду, а фосфат придает ей буферные свойства. В сыворотке крови лошади имеются необходимые для роста микоплазм жиры. ТТХ помогает идентифицировать микоплазмы, восстанавливающие это вещество (3). Пенициллин и ацетат таллия подавляют рост других бактерий.

Плотную среду готовят путем смешивания достаточного количества бульона с автоклавированным раствором агар-агара (конечная концентрации последнего – 1,0-1,2%). Посевы инкубируют во влажной атмосфере (аэробно или в атмосфере 5-10% углекислого газа).

Контроль качества:

Внешний вид порошка:

Гомогенный сыпучий желтый порошок.

Цвет и прозрачность готовой среды:

Среда имеет желтую окраску, прозрачна или слегка опалесцирует.

Кислотность среды:

При 25°С водный раствор (4,23% вес/об) имеет рН 8,0 ± 0,2.

Культуральные свойства:

Ростовые характеристики референс-штаммов через 36-72 ч при 35°С в атмосфере 10% углекислого газа.

Штаммы микроорганизмов (АТСС)	Рост
Mycoplasma synoviae (25204)	Хороший или обильный
Mycoplasma gallinarium (19708)	Хороший или обильный

Ссылки:

1. Sabin, 1941, Bacteriol. Rev., 5:1, 331.
2. Hayflick and Chanock, 1965, Bacteriol, Rev., 29:185.
3. Ann. N.Y. Acad. Sci., 1967, 143, Art.1, 170.

Условия и сроки хранения:

Порошок хранить при температуре ниже +25°С. Использовать до даты, указанной на этикетке. Готовую среду хранить при температуре +2…8°С.