Wagatsuma Agar Base Основа агара для теста Канагавы

M626

 

Этот агар рекомендуют для определения вирулентности Vibrioparahaemolyticus в тесте Канагавы.

Состав**:

Ингредиенты	грамм/литр
Пептический перевар животной ткани	10,00
Дрожжевой экстракт	3,00
Натрия хлорид	70,00
Калия гидрофосфат	5,00
Маннит	10,00
Кристаллический фиолетовый	0,001
Агар-агар	15,00
Конечное значение рН (при 25°С) 8,0 ± 0,2

** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам

Приготовление:

Размешать 11,3 г порошка в 100 мл дистиллированной воды. Подогреть до кипения для полного растворения частиц. Стерилизовать текучим паром в течение 30 мин. Остудить до 50°С. Добавить на 100 мл среды 2 мл (приблизительно до 0,5%) трижды отмытых в физиологическом растворе эритроцитов свежей цитратной крови человека. Тщательно перемешать и разлить в стерильные чашки Петри.

Принцип и оценка результата:

Этот агар готовится по прописи Вагацумы (1), он рекомендован АРНА (2) для дифференциации патогенных и непатогенных штаммов Vibrioparahaemolyticus по продукции термостабильного гемолизина прямого действия в тесте Канагавы (3). Широко проведенные исследования на экспериментальных моделях подтвердили роль этого фактора вирулентности Vibrioparahaemolyticus (4). Показано, что энтеропатогенные штаммыVibrioparahaemolyticus всегда позитивны в указанном тесте, а морские изоляты всегда негативны. Положительным результатом в тесте Канагавы является появление в течение 24 ч при 37°С вокруг колоний прозрачной зоны из разрушенных эритроцитов вокруг колоний (b-гемолиз).

Пептический перевар животной ткани и дрожжевой экстракт служат источником азотистых питательных веществ, углерода, серы, витаминов группы В и микроэлементов, необходимых для роста указанных вибрионов. Высокая концентрация соли и щелочное значение рН соответствуют потребностям вибрионов, обеспечивая их селекцию.

Контроль качества:

Внешний вид порошка:

Гомогенный сыпучий светло-желтый порошок.

Плотность готовой среды:

Образуется среда, соответствующая по плотности 1,5%-ному агаровому гелю.

Цвет и прозрачность готовой среды:

Среда имеет светло-голубоватую окраску, прозрачна или слегка опалесцирует, если в чашках Петри формируется гель.

Кислотность среды:

При 25°С водный раствор (11,3% вес/об) имеет рН 8,0 ± 0,2.

Культуральные свойства:

Ростовые характеристики референс-штаммов через 18-24 ч при 35-37°С.

Штаммы микроорганизмов (АТСС)	Рост	Образование гемолизина
Vibrioparahaemolyticus(11344), авирулентный	Обильный	–
Vibrioparahaemolyticus, вирулентный	Обильный	+

Примечание: "+" - прозрачная зона разрушенных эритроцитов вокруг колоний

Ссылки:

1. Wagatsuma S., 1968, Media Circle, 13 : 159.
2. Speck M. (Ed.), 1984, Compendium of Methods for the Microbiological Examination of Foods, 2nd ed., A.P.H.A., Washington, D.C.
3. Sakazaki R., et al, 1968, Jpn. J. Med. Sci. Biol., 21:325.
4. Twedt R.M., Peeler J.T. and Spaulding P.L., 1980, Appl. Environ. Microbiol., 40:1012.

Условия и сроки хранения:

Порошок хранить при температуре ниже +25°С. Использовать до даты, указанной на этикетке. Готовую среду хранить при температуре +2…8°С.