Основа синтетической среды с глютаматом
|
Mineral Modified Glutamate Medium Base (Twin Pack)
Основа синтетической среды с глютаматом модифицированной (двухкомпонентная) |
M643
|
Эту среду (двойной концентрации) используют для подсчета колиформных бактерий в воде и стоках.
 |
Определение колиформных бактерий методом бродильных проб на среде
|
Состав**:
|
Ингредиенты
|
грамм/литр
|
|
Часть А:
|
|
|
Лактоза
|
20,00
|
|
Калия гидрохлорид
|
1,80
|
|
Натрия формат
|
0,50
|
|
L-Цистин
|
0,04
|
|
L-Аргинин
|
0,048
|
|
Тиамин
|
0,04
|
|
Никотиновая кислота
|
0,002
|
|
Пантотеновая кислота
|
0,002
|
|
Магния сульфат
|
0,002
|
|
Железа аммонийного цитрат
|
0,20
|
|
Кальция хлорид
|
0,02
|
|
Бромкрезоловый пурпурный
|
0,02
|
|
Часть В:
|
|
|
Натрия глютамат
|
12,70
|
|
Конечное значение рН (при 25°С) 6,7 ± 0,2
|
|
** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам
Приготовление:
Размешать 22,7 г порошка части А и 12,7 г порошка части В в 1000 мл дистиллированной воды, содержащей 5 г хлорида аммония. Подогреть (при необходимости) для полного растворения частиц. Разлить в пробирки с поплавками. Стерилизовать автоклавированием при 0,7 атм (115°С) в течение 10 мин. Для приготовления среды обычной (не двойной) концентрации смешать 11,35 г порошка части А и 6,35 г порошка части В в 1000 мл дистиллированной воды, содержащей 2,5 г хлорида аммония
Принцип и оценка результата:
Эта среда используется для подсчета колиформных бактерий в воде и стоках. Первая синтетическая среда на основе глютаминовой кислоты для подсчета колиформных бактерий в воде была предложена Folpmers (1). Однако вскоре было установлено, что на среде с глюкозой к 48 ч появляется много ложноположительных результатов (2). В соответствии с модификацией Грея, в среду введен формат и лактоза (3). Такую среду можно использовать и для определения кишечной палочки в хлорированной воде; если при этом определяют небольшие количества Escherichia coli, она дает результаты лучше, чем Лаурил-триптозный бульон с лактозой.
В составе среды различные питательные вещества, включая соли, аминокислоты, витамины. Лактоза – ферментируемый субстрат, бромкрезоловый пурпурный – индикатор рН. По своим питательным качествам среда хорошо подходит для исследования воды и стоков, так как удовлетворяются все питательные потребности колиформных микроорганизмов.
Материал из положительно реагирующих пробирок пересевают на Лаурил-триптозный бульон с маннитом (М10070) и Желчный бульон с бриллиантовым зеленым (М121). Инкубируют при 44°С для определения индолообразования и идентифицируют Escherichia coli.
Контроль качества:
Внешний вид порошка:
Часть А:
Гомогенный сыпучий порошок желтого цвета.
Часть В:
Гомогенный сыпучий порошок белого цвета.
Цвет и прозрачность готовой среды:
Среда имеет лиловую окраску, прозрачна, без какого-либо преципитата.
Кислотность среды:
При 25°С водный раствор среды (смеси 2,27%, вес/об, части А и 1,271%, вес/об, части В с добавлением 0,5% хлорида аммония) имеет рН 6,7 ± 0,2.
Культуральные свойства:
Ростовые характеристики референс-штаммов через 18-48 ч при 37°С.
|
Штаммы микроорганизмов (АТСС)
|
Рост
|
Кислота
|
Газ
|
|
Escherichia coli (25922)
|
Обильный
|
+
|
+
|
|
Enterobacter aerogenes (13048)
|
Обильный
|
+
|
–
|
|
Salmonella typhi (6539)
|
Обильный
|
–
|
–
|
|
Shigella flexneri (12022)
|
Обильный
|
–
|
–
|
|
Staphylococcus aureus (25923)
|
Подавляется
|
–
|
–
|
|
Enterococcus faecalis (29212)
|
Подавляется
|
–
|
–
|
Ссылки:
1. Folpmers T., 1948, Ant. V. Leeuwenhoek, J. Microbiol. Serol., 14:58.
2. Public Health Laboratory Service, Water Committee, 1958, J. Hyg. Camb., 56:377.
3. Gray R.D., 1959, J. Hyg. Camb., 57:249.
Условия и сроки хранения:
Порошок хранить при температуре ниже +25°С. Использовать до даты, указанной на этикетке. Готовую среду хранить при температуре +2…8°С.