|
|
Всего посетителей: 3851042
|
|
|
Основа агара KG
Среду KG (Kim-Goepfert) с соответствующими добавками используют для стимуляции быстрого спорообразования у Bacillus cereus и Bacillus thuringiensis. Состав**:
** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам Приготовление:Тщательно размешать 19,53 г порошка в 900 мл дистиллированной воды. Подогреть до кипения для полного растворения частиц. Стерилизовать автоклавированием при 1,1 атм (121°С) в течение 15 мин. Остудить до 50°С и асептично добавить 100 мл стерильной эмульсии яичного желтка (FD045) и растворенную в воде полимиксиновую добавку (FD003). Тщательно перемешать и разлить в стерильные чашки Петри. Принцип и оценка результата:Эта среда предложена Kim и Goepfert (1) для стимуляции свободного спорообразования у Bacillus cereus и Bacillus thuringiensis в течение 20-24 ч. Ее рекомендуют для тех же целей специалисты АРНА (2). Пептический перевар животной ткани и дрожжевой экстракт поддерживают рост Bacillus cereus, Bacillus thuringiensis и Bacillus polymixa, которые продуцируют лецитиназу, но только в богатых питательными веществами средах. Лецитиназная активность проявляется образованием вокруг колоний зоны помутнения. Bacillus cereus устойчивы к полимиксину В. Этот антибиотик подавляет рост грамотрицательных микроорганизмов. Bacillus cereus и Bacillus thuringiensis можно отличить друг от друга при микроскопии, т.к. последние при спорообразовании имеют в клетках кристаллы эндотоксина. Данную среду можно заменить на среду PEMPA разных вариантов (3, 4). Контроль качества:Внешний вид порошка:Гомогенный сыпучий светло-розовый порошок. Плотность готовой среды:Образуется среда, соответствующая по плотности 1,8%-ному агаровому гелю. Цвет и прозрачность готовой среды:Основа среды имеет оранжевую окраску, после добавления стерильного желтка и сульфата полимиксина В становится оранжеватой, опалесцирует, если в чашках Петри формируется гель. Кислотность среды:При 25°С водный раствор (1,95% вес/об) имеет рН 6,8 ± 0,2. Культуральные свойства:Ростовые характеристики референс-штаммов через 24 ч при 30-35°С.
Примечание: "+" - зона помутнения вокруг колоний Ссылки:1. Kim H.V. and Goepfert J.M., 1971, Appl. Microbiol, 22:581. Условия и сроки хранения:Порошок хранить при температуре ниже +25°С. Использовать до даты, указанной на этикетке. Готовую среду хранить при температуре +2…8°С.
|