Blood Agar Base No.2 Основа кровяного агара N 2	М834
Blood Agar Base No.2 with 1.2% Agar Основа кровяного агара N 2 1,2% агар-агара	M834A

 

 

Эта среда специально разработана для выделения с максимальной эффективностью прихотливых микроорганизмов, независимо от их способности к гемолизу.

 

Рост колоний Streptococcus pyogenes на кровяном агаре N 2 (M834)

 

Состав**:

Ингредиенты	М834 грамм/литр	М834А грамм/литр
Протеозопептон	15,00	15,00
Печеночный экстракт	2,50	2,50
Дрожжевой экстракт	5,00	5,00
Натрия хлорид	5,00	5,00
Агар-агар	15,00	12,00
Конечное значение рН (при 25°С) 7,4 ± 0,2

** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам

Приготовление:

Размешать 21,25 г порошка М834 или 19,75 г порошка М834А в 500 мл дистиллированной воды. Прокипятить для полного растворения частиц. Стерилизовать автоклавированием при 1,1 атм (121°С) в течение 15 мин. Остудить до 40-50°С и асептично внести до 7% стерильную дефибринированную кровь.

Для культивирования бруцелл: добавить в 500 мл расплавленной стерильной основы растворенное в воде содержимое 1 пузырька с селективной добавкой для бруцелл (FD155).

Для культивирования кампилобактеров: добавить в 500 мл расплавленной стерильной основы растворенное в воде содержимое 1 пузырька с одной из селективных добавок для кампилобактеров (FD006, FD165 или FD008) или 1 пузырька с ростовой добавкой для кампилобактеров (FD009).

Для культивирования стрептококков: добавить в 500 мл расплавленной стерильной основы растворенное в воде содержимое 1 пузырька со стрептококковой добавкой (FD031).

Тщательно перемешать и разлить среду в стерильные чашки Петри.

Принцип и оценка результата:

Эту среду можно использовать в качестве основы для приготовления селективных агаров, например, после добавления соответствующих антибиотиков, для бруцелл или кампилобактеров (1, 2). Следует отметить, что культуры бруцелл относятся к возбудителям особо опасных инфекций и требуют соответствующего обращения. Бруцеллы культивируются лучше в присутствии 5-10% углекислоты в атмосфере. При добавлении лошадиной крови эту среду можно использовать для первичного выделения видов Haemophilus. Результаты получаются лучше, если на половину такой среды в чашке нанести 2 капли 10%-ного раствора сапонина (3). Введение в состав среды печеночного и дрожжевого экстрактов способствует усилению роста и гемолитических реакций таких прихотливых микроорганизмов, как стрептококки (в том числе пневмококки). Хромогенные бактерии на данной среде растут с выраженным пигментообразованием.

Контроль качества:

Внешний вид порошка:

Гомогенный сыпучий желтый порошок.

Плотность готовой среды:

Образуется среда, соответствующая по плотности 1,5%-ному (М834) или 1,2%-ному (М834А) агаровому гелю.

Цвет и прозрачность готовой среды:

Основа среды имеет желтую окраску, прозрачна или слегка опалесцирует при затвердевании. После добавления крови среда должна иметь вишнево-красный цвет и опалесцирует, если в чашках Петри формируется гель.

Кислотность среды:

При 25°С водные растворы М834 (4,25% вес/об) или М834А (3,95% вес/об) имеют рН 7,4 ± 0,2.

Культуральные свойства:

Ростовые характеристики референс-штаммов через 18-48 ч при 35-37°С.

Штамм микроорганизмов (АТСС)	Рост	Гемолиз
Neisseria meningitidis (13090)	Хороший или обильный	–
Streptococcus pneumoniae (6303)	Хороший или обильный	альфа
Streptococcus pyogenes (19615)	Хороший или обильный	бета
Staphylococcus aureus (25923)	Хороший или обильный	бета

Ссылки:

1. Hunter D. and Kearns M., 1977, Brit. Vet. J., 133:486.
2. Skirrow M.B., 1977, B.M.J., ii:9.
3. Waterworth and Pamela M.,1955, Brit. J. Exp. Pathol., 36:186.

Условия и сроки хранения:

Порошок хранить при температуре ниже +25°С. Использовать до даты, указанной на этикетке. Готовую среду хранить при температуре +2…8°С.