Iron Sulphite Agar Железосодержащий сульфитный агар

M868

 

Эту среду рекомендуют для определения термофильных анаэробов, вызывающих «сульфидную» порчу пищевых продуктов.

Состав**:

Ингредиенты	грамм/литр
Гидролизат казеина	10,00
Натрия сульфит	0,50
Железа (III) цитрат	0,50
Агар-агар	15,00
Конечное значение рН (при 25°С) 7,1 ± 0,2

** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам

Приготовление:

Тщательно размешать 26,0 г порошка в 1000 мл дистиллированной воды. Прокипятить для полного растворения частиц. Стерилизовать автоклавированием при 1,1 атм (121°С) в течение 15 мин.

Принцип и оценка результата:

Этот агар является модификацией сульфитного агара, разработанного американскими специалистами по консервированию (1). Beerens (2) показал, что сульфит в первоначально предложенной концентрации 0,1% подавляет рост некоторых штаммов Clostridium sporogenes. Другие авторы (3) позже показали, что концентрация 0,05% сульфита не подавляет рост микроорганизмов. Для определения микроорганизмов, вызывающих «сульфидную» порчу пищевых продуктов, применяют два метода.

А) Метод глубинного посева: вносят в расплавленную и остуженную до 50°С питательную среду 10 мл испытуемого образца, дают агару застыть и затем инкубируют при 55°С в течение 24-48 ч.

Типичные термофильные бактерии – Desulfotomaculum nigrificans – образуют хорошо различимые круглые черные колонии в глубине среды.

Б) Метод Эттенборо-Скарр (4): Разведенные образцы сахара или другого пищевого продукта пропускают через мембранные фильтры, скручивают их и опускают в пробирки, содержащие данную среду (при 50°С) в таком количестве, чтобы хватило покрыть его. Дают среде застыть и затем инкубируют при 55-56°С в течение 24-48 ч. После инкубирования подсчитывают количество черных колоний, выросших на фильтре. Затем проводят идентификацию культур подозрительных микроорганизмов. Мембранная техника более точная, быстрая и производительная.

Контроль качества:

Внешний вид порошка:

Гомогенный сыпучий желтый порошок.

Плотность готовой среды:

Образуется среда, соответствующая по плотности 1,5%-ному агаровому гелю.

Цвет и прозрачность готовой среды:

Готовая среда имеет желтую окраску, слегка опалесцирует, если в пробирках формируется гель.

Кислотность среды:

При 25°С водный раствор (2,6% вес/об) имеет рН 7,1 ± 0,2.

Культуральные свойства:

Ростовые характеристики референс-штаммов через 24-48 ч при 55-56°С в анаэробных условиях.

Штаммы микроорганизмов (АТСС)	Рост	Цвет колоний
Clostridium sporogenes (19404)	Обильный	Черный
Clostridium botulinum (25763)	Обильный	Черный
Desulfotomaculum nigrificans (19858)	Обильный	Черный
Escherichia coli (25922)	Хороший	Почернения нет

Ссылки:

1. Tanner F.W., 1944, “The Microbiology of Foods”, 2nd ed., Garrard Press, Illinois, P. 1127.
2. Beerens H., 1958, DSIR, Proc. 2nd Internat. Sym. Food Microbiol., 1957, HMSO, London, P. 235.
3. Mossel D.A.A., Golstein Brouwers G.W.M.V. and de Bruin A.S., 1959, J. Path. Bact., 78:290.
4. Attenborough J. and Scarr M., 1957, J. Appl. Bact., 20 : 460.

Условия и сроки хранения:

Порошок хранить при температуре ниже +25°С. Использовать до даты, указанной на этикетке. Готовую среду хранить при температуре +2…8°С.