Acid Egg Medium Slant |
SL008 |
Готовая скошенная среда во флаконах для культивирования микобактерий, особенно M.tuberculosis.
Ингредиенты
|
грамм/литр
|
Калия дигидрофосфат
|
12,3
|
Магния сульфат
|
0,3
|
Глицерин
|
12,0 мл
|
Картофельный крахмал
|
30,0
|
Яичная эмульсия
|
1000,0 мл
|
Малахитовый зеленый
|
0,40
|
Бензилпенициллин
|
100 000 ед
|
Засеять во флакон со средой 0,6 мл щелочного гомогената мокроты, приготовленного по методу Маркса (1), и не переворачивать до полного всасывания. Инкубировать при 35-37°С, просматривая еженедельно, до 8 недель.
Приготовление щелочного гомогената мокроты по методу Маркса.
Во флакон, содержащий 2 мл 4% стерильного раствора NaOH, осторожно добавить 2 мл исследуемой мокроты. Перемешать, избегая попадания жидкости на крышку, и инкубировать при 35°С. Перемешивать в течение 20 сек через 7,5мин, 15 мин и 22,5 мин инкубации. Если смесь стала жидкой ранее 30 мин, то ее необходимо высевать. В противном случае высевать через 30 мин, но не позднее.
Метод Маркса (1) является наиболее простым методом выделения и культивирования M.tuberculosis. Он позволяет засевать щелочной гомогенизат мокроты на кислую яичную среду (Acid Egg Medium Slant SL008) без предварительной нейтрализации и центрифугирования, т.к. среда объемом 13,5 мл полностью нейтрализует щелочь, содержащуюся в 0,6 мл гомогената.
Согласно Марксу, этот метод наиболее чувствителен и позволяет определять более низкий уровень контаминации, чем в методах, описанных специалистами Международного союза по борьбе с туберкулезом (2) и Нассау (3).
Яичная среда поддерживает рост широкого спектра микобактерий. Малахитовый зеленый и бензилпенициллин предотвращают рост большинства контаминантов, способных расти быстрее, чем микобактерии. Глицерин усиливает рост M.tuberculosis.
Светлого синевато-зеленого цвета косячки с гладкой опалесцирующей поверхностью.
Ростовые характеристики через 2-4 недели при 35-37°С:
Штаммы микроорганизмов (АТСС)
|
Рост
|
M.tuberculosis (25618)
|
Обильный, колонии гранулированные, неровные, в форме сухой бородавки, рыхлые
|
1.Marks J. (1959) Mon. Bull. Min. Hlth. Lab. Serv. 18.81-86.
2.Report (1055) Bull. Int. Union Tuberc. 25.89.
3.Nassau E. (1958) Tubercle 39. 18-23.
Хранить при 2-8°С. Использовать до даты, указанной на упаковке.