Диски с углеводами
Используются для дифференциации микроорганизмов по их способности ферментировать различные углеводы.
Ферментация углеводов
Микроорганизмы, способные к ферментации того или иного углевода, выращивают в питательной среде с соответствующим диском и индикатором Андреде, который под действием кислых продуктов расщепления углевода изменяет первоначальный соломенно-желтый цвет на красный.
Принцип и оценка результата:
Ферментация микроорганизмами специфического углевода приводит к образованию кислоты или кислоты и газа. Эти характеристики учитываются при идентификации и дифференциации бактерий.
После добавления диска, пропитанный им углевод диффундирует в питательную среду. В ходе его ферментации образуется кислота (или кислота и газ), что способствует изменению цвета индикатора в питательной среде (например, феноловый красный меняет цвет с красного на оранжево-желтый).
Для тестов на ферментацию углеводов могут быть использованы следующие диски:
№ по каталогу | Субстрат | Обозначение |
|---|---|---|
Адонит | Ad | |
Арабиноза | Ar | |
Галактоза | Ga | |
D-Глюкоза | De | |
Дульцит | Du | |
Инозит | Is | |
Инулин | In | |
Ксилоза | Xy | |
Лактоза | La | |
Мальтоза | Ma | |
Маннит | Mn | |
Манноза | Mo | |
Мелибиоза | Mb | |
Раффиноза | Rf | |
Рамноза | Rh | |
Салицин | Sa | |
Сорбит | Sb | |
Сахароза | Su | |
Трегалоза | Te | |
Фруктоза | Fc | |
Целлобиоза | Ce |
Указания по применению:
Готовится и стерилизуется подходящая питательная среда без углеводов. Для данного теста можно рекомендовать следующие питательные среды.
ЖИДКИЕ СРЕДЫ | |
|---|---|
Пептонная вода с индикатором Андреде | |
Пептонная вода с мясным экстрактом и индикатором Андреде | |
Основа бульона с феноловым красным | |
Основа бульона с мясным экстрактом и феноловым красным | |
Основа бульона с бромкрезоловым пурпурным | |
Бульон с бромкрезоловым пурпурным | |
ПОЛУЖИДКИЕ СРЕДЫ | |
Триптон-цистиновый агар | |
Основа среды Хью–Лейфсона для теста ОФ | |
Основа триптонного агара | |
ПЛОТНЫЕ СРЕДЫ | |
Основа агара с феноловым красным | |
Основа агара с бромкрезоловым пурпурным | |
Агар Сандерса | |
На выбор можно использовать любую из перечисленных сред. Жидкие и полужидкие среды после приготовления помещают по 5 мл в пробирки и стерилизуют. После посева испытуемого микроорганизма в каждую пробирку асептически помещают по 1 диску с соответствующим углеводом. В случае полужидкой среды диск погружают по ходу посева на небольшое расстояние от поверхности среды так, чтобы нижняя часть ее служила отрицательным контролем ферментации, наблюдаемой в верхней части. При использовании плотных сред на одной чашке можно определять ферментацию культурой ряда углеводов. После распределения испытуемой культуры по поверхности выбранного питательного агара на него наносят и слегка прижимают диски с углеводами (на расстоянии 2 см друг от друга). Чашку инкубируют в течение 18–48 ч при 35–37°С. Результаты учитывают через 18–24 ч и 48 ч. Желательно часто просматривать результаты, так как возможна их быстрая реверсия. В жидких средах образующаяся кислота способствует окрашиванию среды в красный цвет, а газ скапливается в поплавке. В полужидких средах газ виден в толще среды (пузырьки). На агаровых средах о ферментации углевода свидетельствует изменение цвета среды вокруг диска.
Условия хранения:
Диски хранить при 0…+8°С. Не используйте реактивы после истечения срока годности
ВНИМАНИЕ: материалы надо держать во влагонепроницаемых контейнерах с поглотителем влаги. Перед тем, как открыть контейнер, надо дать ему нагреться до комнатной температуры.