HiMedia: инструкция по применению продукции По всем вопросам обращаться: Почтовый адрес: 123007, Москва, а/я 27. Офис: 123007, Москва, Хорошевское шоссе, д. 13 а, кор.3. Тел/Факс: +7 (495) 940 33 12, 940 33 13, 940 33 14,940 33 96, 940 33 97, 940 33 98. E-mail: himedia@himedialabs.ru Наш сайт: www.himedialabs.ru
Antibiotic Assay Medium No. 3 (Assay Broth) Среда для испытаний антибиотиков № 3 Продукция зарегистрирована в Министерстве здравоохранения Российской Федерации (ФС3 2009/03707)		Кат. № M042

Применение:

Рекомендуется для микробиологических испытаний амикацина, капреомицина, хлортетрациклина, хлорамфеникола, циклосерина, демеклоциклина, дигидрострептомицина, доксициклина, гентамицина, грамицидина, канамицина, метациклина, тилозина согласно официально принятым методам.

Состав**:
Ингредиенты	грамм/литр
Пептический перевар животных тканей (пептон)	5.00
Мясной экстракт	1.50
Дрожжевой экстракт	1.50
Декстроза	1.00
Хлорид натрия	3.50
Калия фосфат двузамещенный	3.68
Калия фосфат однозамещенный	1,32
Конечное значение pH (при 25ºс)	7.0±0.2

Состав **

** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам

 

Приготовление:

Суспендируйте 17,5 г порошка в 1000 мл дистиллированной воды. Подогрейте при необходимости, для растворения компонентов среды полностью. Стерилизовать автоклавированием при 1,1атм. (121°C) в течение 15 минут.

Принцип и оценка результата:

Среда для испытаний антибиотиков № 3 используется при проведении испытаний антибиотиков. Grove и Randall описали свои исследования и среду в их всестороннем трактате об исследовании антибиотиков (1). Среда для испытаний антибиотиков № 3 используется при микробиологической оценке различных антибиотиков в фармацевтических и пищевых продуктах турбидиметрическим методом. Ripperre и др. сообщили, что турбидиметрические методы для определения потенции антибиотиков принципиально более корректны и более точны, чем диффузионные способы на агаре (2). Турбидиметрический метод испытаний антибиотиков основывается на изменении или торможении роста тестируемого микроорганизма в жидкой питательной среде, содержащей однородную концентрацию антибиотика. После инкубации испытуемого микроорганизма в рабочих разбавлениях антибиотиков уровень роста определяется путем измерения коэффициента пропускания света с помощью спектрофотометра. Концентрация антибиотика определяется путем сравнения полученного уровня роста, с уровнем роста, полученным с эталонной концентрацией. Использование этого метода адекватно только когда контрольные пробы прозрачны.

Пептический перевар животных тканей, мясной экстракт и дрожжевой экстракт обеспечивает необходимые питательные вещества и факторы роста для усиленного размножения бактерий. Хлорид натрия поддерживает осмотическое давление питательной среды и сохраняет целостность и жизнеспособность клеток. Фосфаты буферизуют среду. Декстроза служит источником углерода и энергии.

При проведении микробиологической пробы необходимо тщательно соблюдать все условия. Использование стандартных культуральных питательных сред в анализе - одино из важнейших условий для хороших результатов.

 

Контроль качества

Внешний вид порошка:

Кремово-желтый гомогенный сыпучий порошок

 

Цвет и прозрачность готовой среды:

Светло-желтый прозрачный раствор

 

Кислотность среды:

При 25°C водный раствор (1,75% вес/об) имеет рН7.0±0.2

 

pH готовой среды: 6.80-7.20

 

Культуральные свойства:

Культуральные свойства референс-штаммов при 32-37°C через 18-24часа.

Штаммы микроорганизмов (АТСС)	инокулюм (КОЕ)	рост	серийные разведения с
Escherichia coli 10536	50-100	обильный	хлорамфеникол
Klebsiella pneumoniae 10031	50-100	обильный	капреомицин, дигидрострептомицин, стрептомицин, тролеандомицин
Staphylococcus aureus 29737	50-100	обильный	амикацин, хлортетрациклин, циклосерин, демеклоциклин, доксициклин, канамицин, метациклин, окситетрациклин, тилозин, ролитетрациклин, тетрациклин, тобрамицин.
Enterococcus hirae 10541	50-100	обильный	гентамицин, грамицидин, неомицин, новобиоцин
Staphylococcus aureus 9144	50-100	обильный	тилозин
Интерпретация: рост культуры как обильный, хороший, слабый, скудный или отсутствие роста, выраженный в % выросших колоний по отношение к количеству засеянных микроорганизмов: Рост культуры (посевная доза 10 2-10 3 КОЕ/мл):   % от засеянных Обильный: >70 %; Хороший: > 40 % но <70 %; Плохой: > 20 % но <40 %; Скудный – слабый: > 10 % но <20%; Скудный: > 10 %; Нет роста: нет видимых колоний

 

Условия и сроки хранения:

Сохранять при температуре ниже +30ºС в плотно закрытом контейнере. Использовать до даты, указанной на этикетке. Готовую среду хранить при температуре +2-8ºС.

Источники литературы:

1. Grove and Randall, 1955, Assay Methods of Antibiotics Medical Encyclopedia, Inc. New York.
2. Rippere R. A.. Some principles of microbiological turbidimetric assays of antibiotics. J. Assoc. off. Anal. Chem. 1979 62(4):951-6