|
|
Всего посетителей: 3846568
|
|
|
Основа агара / бульона для бруцелл
Эти среды являются основой, которую, после внесения специальных добавок, рекомендуют для обогащения, выделения и культивирования видов бруцелл из клинического и другого материала. Состав**:
** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам Приготовление:Размешать 21,55 г порошка М074 или 14,05 г порошка М348 в 500 мл дистиллированной воды. Подогреть до кипения для полного растворения частиц. Стерилизовать автоклавированием при 1,1 атм (121°С) в течение 15 мин. Остудить до 45-60°С, добавить (до 5% об/об) стерильную инактивированную лошадиную сыворотку (RM1239), для инактивации сыворотку прогревают при 56°С в течение 30 мин) и растворенное в воде содержимое 1 пузырька с селективной добавкой для бруцелл (FD161). Для выделения видов кампилобактеров к 500 мл М074 добавляют растворенное в воде содержимое 1 пузырька с селективной добавкой для кампилобактеров (FD009) и дефибринированную баранью кровь (до 5-7% об/об). Тщательно перемешивают и разливают в стерильные чашки Петри или пробирки. Принцип и оценка результата:Эти среды разработаны для получения обильного роста таких прихотливых микроорганизмов, как бруцеллы, стрептококки (в т.ч. пневмококки), Neisseria meningitidis и Haemophilus influenzae (1). Пептический перевар животной ткани и гидролизат казеина предназначены для снабжения микроорганизмов азотистыми органическими соединениями, а дрожжевой экстракт также в качестве основного источника витаминов группы В. Глюкоза играет роль источника энергии. Среду можно обогатить путем добавления стерильной дефибринированной лошадиной крови (до 5% об/об). Для выделения бруцелл к основе добавляют смесь антибиотиков (2, 3, 4). Высокоселективную среду с антибиотиками предложили Farrel и Robinson (5). Первоначально предложенные этилвиолет и циркулин (6) больше не применяются. Если необходима неселективная среда, можно к основе бульона для бруцелл добавить только сыворотку (без внесения антибиотиков). Это предполагается в том случае, если одна половина пробирок с данным бульоном будет инкубироваться в нормальной атмосфере, а другая – в атмосфере, содержащей 10% углекислоты. Следует отметить, что бруцеллы являются возбудителями особо опасной инфекции и требуют соответствующего обращения. Все выросшие на этих средах предположительно анаэробные микроорганизмы надо подвергать дальнейшей идентификации. Контроль качества:Внешний вид порошка:Гомогенный сыпучий желтый порошок. Плотность готовой среды:Образуется среда, соответствующая по плотности 1,5%-ному (М074) агаровому гелю. Цвет и прозрачность готовой среды:Готовая среда имеет желтую окраску, прозрачна или слегка опалесцирует, если в чашках Петри или пробирках формируется гель. Кислотность среды:При 25°С водные растворы М074 (4,30% вес/об) или М348 (2,81% вес/об) имеют рН 7,0 ± 0,2. Культуральные свойства:Ростовые характеристики референс-штаммов через 24-72 ч при 35°С в присутствии 10% СО2.
Ссылки:1. Finegold et al (Ed.), 1990, Bailey and Scott’s Diagnostic Microbiology, 8th ed., The C.V. Mosby Co., St. Louis. Условия и сроки хранения:Порошок хранить при температуре ниже +25°С. Использовать до даты, указанной на этикетке. Готовую среду хранить при температуре +2…8°С.
|