|
|
Всего посетителей: 3846452
|
|
|
Бульон и агар с ацетамидом
Бульон и агар c ацетамидом применяют для дифференциации грамотрицательных неферментирующих бактерий, в частности Pseudomonas aeruginosa. Состав**:
** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам Приготовление:Размешать 7,63 г порошка M148 (часть Б) или 22,63 г порошка M1033 (часть Б) в 1000 мл дистиллированной воды. Добавить в соответствующую среду 10 г порошка из части А. Подогреть до кипения для полного растворения частиц. Разлить среду в пробирки или флаконы в необходимом количестве. Стерилизовать автоклавированием при 1 атм (121°С) в течение 15 мин. Остудить пробирки с агаром в наклонном положении для формирования скоса. Принцип и оценка результата:Среды с ацетамидом рекомендуются, например, соответствующей инструкцией АРНА по исследованию воды (1). Используя минеральную основу сред, Gilardi и соавт. показали, что ацетамид утилизируют многие неферментирующие бактерии (2, 3). Указанные среды содержат неорганические соли и ацетамид в качестве единственного источника углерода и азота. Растущие на среде микроорганизмы дезаминируют ацетамид (проявляя ациламидазную активность)(4, 5). Этим свойством обладают Pseudomonas aeruginosa, Achromobacter xylosoxidans и “Alcaligenes odorans”(6). В результате дезаминирования ацетамида образуется аммиак, сдвигающий рН в щелочную сторону. Среда, соответственно, меняет цвет с желто-оранжевого на лилово-красный. У некоторых медленно ферментирующих штаммов эти изменения появляются лишь к 7 суткам. Положительную реакцию дают примерно 40% штаммов P.aeruginosa, обладающих пиоцианином, поэтому в случае отрицательного результата с ацетамидом необходимы дополнительные дифференциальные тесты. Контроль качества:Внешний вид порошка:Часть А: бесцветные расплывающиеся кристаллы. Часть Б: гомогенный сыпучий розовый порошок. Плотность готовой среды:Образуется среда, соответствующая по плотности 1,5%-ному агаровому гелю (М1033). Цвет и прозрачность готовой среды:Среда имеет оранжевую окраску, прозрачна или слегка опалесцирует, если в пробирках или чашках Петри формируется гель. Кислотность среды:При 25°С водный раствор М148 (смесь из 1% вес/об части А и 0,76% вес/об части Б) имеет рН 7,0 ± 0,2, а водный раствор М1033 (смесь 1% вес/об части А и 2,263% вес/об части Б) – рН 6,9 ± 0,2. Культуральные свойства:Ростовые характеристики референс-штаммов через 4-7 дней при 35-37°С.
Примечание: Ссылки:1. Eaton A., Clesceri L. and Greenberg A. (Eds.), 1995, Standard Method for the Examination of Water and Wastewater, 19th ed., APHA, Washington, DC. Условия и сроки хранения:Порошок хранить при температуре ниже +25°С. Использовать до даты, указанной на этикетке. Готовую среду хранить при температуре +2…8°С.
|